bFGF对前脂肪细胞增殖和分化的作用(1)
[摘要]目的：探讨bFGF对体外培养前脂肪细胞增殖和分化活性的影响。方法：无菌条件下抽吸的脂肪组织进行前脂肪细胞的原代培养，加入生长因子bFGF 10ng/ml，用 MTT 法观察人前脂肪细胞生长状态，测定前脂肪细胞合成甘油三酯的总量。 结果：bFGF有明显的促增殖作用,与对照组比较第1、2天差异不明显，随时间的推移，第6～7天到达高峰；到分化6天和9天时,甘油三酯总量明显升高,与对照组相比差异均有显著性(P2培养箱中培养。
1.4 前脂肪细胞传代
1.5重组人bFGF对前脂肪细胞增殖的影响：将第二代细胞按104个/孔(含 100μl培养液)接种于 96 孔板(每板分2组，每组3×8 孔，其中1组为对照)。实验组加入生长因子(bFGF10ng/ml)，对照组为仅含10%小牛血清的人前脂肪细胞基础培养液。连续培养8天(实验组每两天更换含同样生长因子浓度的培养液， 对照组按同样频率常规换液)，每天以MTT 法观测细胞增殖情况(每组测定样本3例， 取平均数作OD值)
1.6 重组人：bFGF对前脂肪细胞合成甘油三酯总量(TG mass)的影响：将第二代细胞按 104个/孔(含100μl培养液)接种于 96 孔板(每板分2组，每组 3×8 孔，其中1 组为对照)。培养2天待细胞融合后后加入分化培养基，实验组加入生长因子(bFGF10ng/ml)， 对照组为仅含10%小牛血清的人前脂肪细胞分化培养液。在培养的第3、6、9 天，胰酶消化，离心，收集细胞，冻融裂解，离心，收集上清，用甘油三酯试剂盒在酶标仪上检测每孔前脂肪细胞合成甘油三酯总量。, http://www.100md.com(毋巨龙 李世荣)
1.4 前脂肪细胞传代
1.5重组人bFGF对前脂肪细胞增殖的影响：将第二代细胞按104个/孔(含 100μl培养液)接种于 96 孔板(每板分2组，每组3×8 孔，其中1组为对照)。实验组加入生长因子(bFGF10ng/ml)，对照组为仅含10%小牛血清的人前脂肪细胞基础培养液。连续培养8天(实验组每两天更换含同样生长因子浓度的培养液， 对照组按同样频率常规换液)，每天以MTT 法观测细胞增殖情况(每组测定样本3例， 取平均数作OD值)
1.6 重组人：bFGF对前脂肪细胞合成甘油三酯总量(TG mass)的影响：将第二代细胞按 104个/孔(含100μl培养液)接种于 96 孔板(每板分2组，每组 3×8 孔，其中1 组为对照)。培养2天待细胞融合后后加入分化培养基，实验组加入生长因子(bFGF10ng/ml)， 对照组为仅含10%小牛血清的人前脂肪细胞分化培养液。在培养的第3、6、9 天，胰酶消化，离心，收集细胞，冻融裂解，离心，收集上清，用甘油三酯试剂盒在酶标仪上检测每孔前脂肪细胞合成甘油三酯总量。, http://www.100md.com(毋巨龙 李世荣)