1.2.2 VFGF明胶微球体外释放测定：根据人VEGF ELISA试剂盒说明用酶联免疫仪于490nm测定吸光度值(A值)绘制标准曲线。取微球样品10mg,放入PBS(pH7.4)缓冲液中,完全溶解后定容至100ml,取10μl另加90μl共100μl测出A值。由此计算出微球的载药率和包封率.载药率=(投药量-上清液中药量)/微球重量×100%；包封率=(投药量-上清液中药量)/投药量×100%。

    动态透析法进行体外释药实验,将制备的复合缓释微球10mg混悬于PBS(pH7.4)100ml中,置于37℃水浴摇床(135r/min)分别于各时间点(1,2,3,4,5,6,7天)取上清液100μl,测量其浓度,绘制复合微球释药曲线。

    1.3 大鼠背部缺血皮瓣模型的制备：戊巴比妥钠30mg/kg腹腔注射麻醉，将动物俯卧位固定，鼠背部以10%硫化钠脱毛，温水洗净。于鼠背正中掀起8.0cm×2.0cm随意皮瓣,其纵轴与大鼠脊柱平行，且以之为对称轴，蒂位于双侧髂嵴连线上。在距离蒂部3.6cm、4.8cm、6.0cm处分别作为蒂部平行的直线，与顺皮瓣长轴的三等分线相交于六点，这六点为注射位点。切开皮肤及皮下，于筋膜浅层掀起皮瓣，结扎基底部活跃出血点。皮瓣掀起后即刻以微量注射器于皮下进针，A组皮瓣下每一注射位点给予200ng/ml VEGF-缓释微球1m1,B组皮瓣下每一注射位点给予200ng/ml VEGF溶液1m1，C组皮瓣下予等量的生理盐水注射1ml ......