1.5.3 杂交：固化上寡核苷酸探针的膜条连同40μlPCR产物加入含5ml 2×SSC～0.1%SDS的试管中，100℃水浴变性7min，置杂交仪中42℃杂交3～6h；然后放入42℃预热的0.5×SSC～0.1%SDS中洗膜10min；将膜条转入含2.5U辣根过氧化物酶连链酶抗生素蛋白的10ml2×SSC～0.1%SDS试管中，室温反应15min；再用2×SSC～0.1%SDS洗膜5min×2次；最后，将膜条转入20ml显色液[19ml0.1mol/L柠檬酸钠(pH5.0)中加30%过氧化氢3μl和0.1mg/mlTMB]中避光显色5～15min,期间观察、记录结果。

    1.5.4 结果判定：杂交结束后膜条上格显示蓝紫色斑点为Pro/Pro基因型，中格显示蓝紫色斑点为Arg/Arg基因型，而上、中全部显示为Pro/Arg基因型，下格为空白对照，不应显示斑点(图2)。

    1.6统计学处理：应用SPSS10.0统计软件包处理数据。单个基因型及组间等位基因频率的比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有显著性意义,并以比值比(odds ratio,OR) 及其95%可信区间(confidenceinterval,CI) 表示相对风险度 ......