VEGF促进多孔聚乙烯耳支架植入的效果观察(2)
1.3 采集标本
1.3.1 术后第7天分别从2组中随机抽取10只兔子,用3%戊巴比妥钠耳静脉注射麻醉(30mg/kg),常规脱毛消毒,在无菌条件下,取出置入的支架,用10%甲醛固定常规石蜡包埋切片。
1.3.2 术后第14天,2组中剩余的10只兔子,用同样方法取出材料,用10%甲醛固定常规石蜡包埋切片。
1.4 免疫组化分析
1.4.1 将切好的石蜡组织切片用APES粘贴,脱蜡至水。
1.4.2 用蒸馏水配制的体积分数3%的H2O2室温浸泡5min。以灭活内源酶,微波修复抗原后用SABC法染色。
1.4.3 加入SABC,37℃反应20min,PBS洗两次,以DAB显色,苏本素轻度复染后,脱水、透明、封片、显微镜下观察分析。
1.5 肉芽组织血管面积和肉芽组织长入深度的分析
1.5.1 肉芽组织中血管面积的测量:分别对应用外源VEGF组及对照组在第7天和第14天随机抽取10只兔子中的5个蜡块横切制成切片,HE染色后,用北航图形分析系统作肉芽组织血管面积分析。方法是在每张切片上随机抽取5个400倍显微镜视野进行分析,计算这5个视野中血管断面面积占镜下肉芽组织面积的比值。
1.5.2 肉芽组织长入深度测量:再分别对两组在第7天和第14天抽取的10只兔子中的剩余的5个蜡块 ......
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