1.1.2仪器:大鼠皮肤碾压撕脱伤模型机,西京医院全军整形外科研究所研制。荧光检测仪,日本日立公司。

    1.1.3动物:SD大鼠39只,体重280～320g,购于第四军医大学实验动物中心。

    1.2方法

    1.2.1大鼠碾压撕脱皮瓣的制备[3]:1%戊巴比妥钠(30mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠,剪除背部的毛发,75%酒精消毒,以鼠背中线为准,设计蒂位于尾侧,大小约为3cm×9cm的长方形任意皮瓣,切开皮肤至肉膜,从肉膜下掀起皮瓣。将制作好的大鼠背部任意皮瓣置于皮肤碾压撕脱伤模型机的电子天平上,开动电机,控制滑轮转速为50r/min,调节滑杆高度使得模型机作用于皮瓣的压力数值范围为2.0～2.5kg,推动滑动齿轮匀速碾压皮瓣,重复三次,以制作碾压撕脱皮瓣模型。

    1.2.2实验分组:将大鼠随机分为3组,每组13只。组A(阴性对照)给予生理盐水1ml/kg 腹腔注射,组B给予血管钠肽0.1mg/kg 静脉注射,组C(阳性对照)给予地塞米松5mg/kg 腹腔注射。各组给药时间点为术后2h、1天、2天和3天。大鼠的血清于术后12h、1天、2天和 3天收集用以体外实验。

    1.2.3皮瓣成活率计算:在皮瓣术后第7天,皮瓣成活区与坏死区已明确,用数码相机进行摄影,用Image-pro plus.v5.0图像分析系统,计算各组皮瓣成活率。

    1.2.4脐静脉内皮细胞的培养与鉴定:参照文献方法[4],新鲜脐带取回后以细胞收集液冲洗至冲出液清亮 ......