1材料和方法

    1.1 实验动物:供者为Brown Norway(BN,RT1n)大鼠,受者为Lewis(RT11)大鼠。供、受者均为近交系健康大鼠,雄性,体重200～300g,均购自北京维通利华实验动物有限公司,并由第四军医大学实验动物中心按SPF级条件进行饲养。

    1.2 重组腺病毒:AdCTLA-4Ig为携带人CTLA-4Ig基因的5型非增殖型腺病毒,滴度为4×109蚀斑形成单位(PFU)/ml;对照病毒AdEGFP为EGFP基因的5型非增殖型腺病毒,滴度为4×109 PFU/ml。均由上海医元生物基因科技发展有限公司提供。

    1.3 实验分组:实验随机分为三组,每组10只。A组(空白对照组)供瓣离体期间以PBS溶液灌注;B组(阴性对照组)供瓣离体保存时灌注携带EGFP基因的重组腺病毒AdEGFP 1×109 PFU;C组(AdCTLA-4Ig转染组)供瓣离体保存时灌注携带CTLA-4Ig基因的重组腺病毒AdEGFP 1×109 PFU。

    1.4 同种异体复合组织移植模型的建立:本实验以Brown Norway大鼠为供体,Lewis大鼠为受体,以股动、静脉为蒂进行同种异体腹部游离皮瓣移植,作为复合组织移植的模型。1%戊巴比妥钠(产自佛山市实验化工厂)按50mg/kg腹腔注射麻醉成功后,在腹股沟处找到股动脉搏动点,在其上方设计一大小3cm×2.5cm腹部皮瓣。沿腹肌肌膜表面小心切开皮瓣,可见皮瓣由皮肤和其下的肉膜组成 ......