组织工程室内带血管蒂的脂肪瓣自发生长的研究(2)
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1.4 手术过程:所有手术均在无菌条件下进行,3%戊巴比妥钠1ml/kg,耳缘静脉注射麻醉。动物仰卧位,剃毛,消毒。在耻骨联合上2cm做切口,切口长约5cm,按血管蒂长2cm,脂肪瓣4cm×1cm的大小剥离双侧脂肪瓣。直接切取一侧脂肪瓣测量体积,把另外一侧脂肪瓣通过室一侧的通道转移入带孔的组织工程室,确定组织工程室的位置,保证血管蒂部不受牵拉,后用不可吸收线把半球底部与下面的肌肉组织缝合固定,防止脱落,两侧边也固定在肌肉组织上,防止旋转。缝合上下两个半球缘部,上半球固定于表面皮肤。所有脂肪瓣中大血管结扎止血,小的电凝止血。最后用3-0的丝线缝合皮肤切口。所有实验动物对手术耐受良好。
1.5 取材:6周后,再次麻醉兔子,切口方向同术前,打开双侧腹股沟区,肉眼判断腹壁下浅动脉是否通畅。在切取室内内容物的过程中明显看到血液外流,并进一步用钳夹测试血流。切取组织工程室内内容物后测量体积,并进行组织形态学分析。
1.6 分析方法:取材时大体观察;对照组和实验组均采用液体容积法测量体积;组织学观察:组织块用10%的福尔马林固定,后用HE染色分析。
1.7 统计学方法:采用SPSS13.0统计软件分析。对照组和实验组脂肪瓣的体积大小采用配对样本t检验,P<0.05为有统计学意义。
2结果
2.1 大体形态观察和皮瓣体积:术后6周取材时,所有组织工程室外形成一层血管化的包膜,切开包膜后看到有淡黄色的组织液流出。观察组织工程室室内容物没有明显的炎症和组织坏死。脂肪瓣外包绕着结缔组织构成的包膜,包膜较薄,触之柔软,且包膜通过室表面的孔径与室外面的血管化的包膜交通(图3)。包膜掀开后见脂肪瓣存活情况良好,血运良好。所有组织工程室内内容物的体积均增大,体积(0.5225±0.031)ml增加到(3.7625±0.106)ml。脂肪瓣外面结缔组织构成的包膜体积(0.7525±0.04)ml,包膜占整个组织工程室内内容物体积的20%。去除薄膜后,脂肪瓣的体积从(0.5225±0.031)ml增加到(3.01±0.135)ml,增加了476%,与对照组相比两者之间的体积差异有统计学意义(P<0.05)(表1)。对照组代表脂肪瓣插入组织工程室第0天的体积大小。
2.2 组织学观察:对照组代表脂肪瓣插入组织工程室0天的情况,HE染色显示成熟的脂肪组织以及供应营养物质的血管和纤维间隔 ......
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