人小涎腺成纤维样单克隆细胞的成骨分化(1)

http://www.100md.com 2010年2月15日 杜明娟,赵振民,严 笠,尹宁北,宋 涛,李海东

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     [摘要]目的:探索人小涎腺成纤维样单克隆细胞的体外培养、扩增方法,鉴定其性质,研究向成骨细胞分化的潜能。方法:组织块贴壁法原代培养人小涎腺细胞,收集成纤维样细胞,用96孔板稀释铺板法克隆培养,免疫荧光和RT-PCR检测细胞表型,并进行成骨诱导分化,通过骨钙素、一型胶原免疫细胞化学染色及碱性磷酸酶、茜素红钙结节染色鉴定成骨分化。结果:成功的在体外扩增培养出人小涎腺成纤维样单克隆细胞,免疫荧光证实细胞表达CD13、CD29、CD106和CD44,RT-PCR显示CK18、α-SMA、vimentin、CD106、nestin基因表达与人骨髓间充质干细胞相似。成骨诱导8天后,碱性磷酸酶表达阳性率100%,19天后骨钙素和一型胶原大量表达,并形成钙结节。结论:所建立的分离培养体系能够获得大量人小涎腺成纤维样单克隆细胞,免疫表型类似于间充质干细胞。在成骨诱导培养条件下具有良好的向成骨细胞分化的潜能。

    [关键词]小涎腺;单克隆培养;成骨诱导;组织工程骨

    [中图分类号]Q813.1 [文献标识码]A [文章编号]1008-6455(2010)04-0523-04

    Osteogenic differentiation of human small salivary gland fibroblast-like monoclonal cells

    DU Ming-juan, ZHAO Zhen-min, YAN Li, YIN Ning-bei, SONG Tao, LI Hai-dong

    (Plastic Surgery Hospital, Peking Union Medical College, Chinese Academy of Medical Sciences, Peking 100144, China)

    Abstract:ObjectiveExplore the method of culturing and proliferating human small salivary gland fibroblast-like monoclonal cells in vitro, identify the character of the cells and study the potential of osteoblast differentiation ......

    http://www.100md.com/html/paper/1008-6455/2010/04/29.htm

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