大鼠上颌第一磨牙正畸移动中牙周膜神经PGP9.5的表达(2)
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1.5图像分析:本实验采用光密度分析,显色底物为DAB,染色呈棕黄色,颜色深浅反映了DAB的沉积量,即目标抗原的量。光密度即为图像的灰度,与染色程度成反比,即蛋白表达强则标本染色强,透光弱,灰度值低;反之,则标本染色弱,透光强,灰度值高。每组SABC染色切片各一张,使用Q550CW图像信号采集与处理仪,对每张免疫组化染色后的切片作PGP9.5分析。测量得出平均灰度值。染色强的标本透过弱,灰度值低,阳性率高;染色弱的标本透光强,灰度值高,阳性率低。
1.6统计学分析
1.6.1质量控制:为了减小测量误差,选择2名实验观察者,其学历、资历、技能相近,掌握图形分析软件的基本操作,事先未参与实验设计。在3个月内对受检标本进行3次测量,所有数据进行t检验,无统计学差异。此时选用平均值纳入统计。
1.6.2数据采用数据±标准差表示,利用Spss13.0统计分析软件对实验数据进行统计学分析。对数据进行正态性检验及方差齐性检验,方差齐时,组间两两比较采用t检验;方差不齐时,两两比较采用t'检验,P<0.05表示有统计学意义。
2结果
2.1组织学观察
2.1.1对照组(0天):根尖和根中1/3牙周膜内可见PGP9.5免疫阳性的神经纤维,其中一部分与牙骨质平行。在牙周膜的根尖区域,PGP9.5免疫阳性的神经纤维主要分布在血管周围。少许牙周神经纤维延伸到牙根的表面和细胞牙骨质层(如图2)。
2.1.2实验组:①3天组(如图3):与对照组相比,压力侧的神经纤维的密度增加。其中根尖压力侧近牙槽骨区可见稠密的、串珠状的神经纤维的神经纤维无规则的排列;②7天组(如图4):与对照组相比,压力侧的神经纤维的密度有所增加,近牙槽骨区可见沿着血管分布PGP9.5免疫阳性的神经纤维。而靠近牙骨质区,没有看到分枝状的神经末梢。在牙槽骨表面出现类骨质的沉积。但是在牙根吸收区或附近,并没有发现神经纤维;③14天组(如图5):神经密度减小,接近对照水平。根尖牙周膜的神经主要集中在靠近牙槽骨的区域。在一些区域还是可以看到透明化的牙周组织残留,但是牙周膜神经纤维在这些透明区的附近很少发现。在牙根吸收区域内或附近,没有出现牙周膜神经纤维;④21天组(如图6):大鼠上颌右侧第一磨牙的根吸收陷窝处可见免疫阳性的牙周神经纤维;这些神经纤维靠近细胞牙骨质层。在修复牙本质形成的区域,有免疫阳性神经局限性的萌发反应 ......
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