组织工程化犬气管的生物力学研究(2)
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1.2.2消化步骤如下:①加入消化液A,恒温摇床4℃震荡24h,每8h更换新的消化液;②加入消化液B,恒温摇床4℃震荡24h,每8h更换新的消化液;③4℃ D-Hanks震荡洗涤4次,每次15min;④加入消化液C,恒温摇床4℃震荡24h,每8h更换新的消化液;⑤所取4℃D-Hanks震荡洗涤4次,每次15min;⑥加入消化液D,恒温摇床37℃震荡4h;⑦加入消化液C,恒温摇床4℃震荡24h;⑧4℃ D-Hanks震荡洗涤48h,4℃ D-Hanks内保存备用
1.3 气管无载荷状态的内、外壁周长以及零应力状态的内、外壁弧长和张开角的测量方法:用着色笔分别标明气管软骨部分和肌肉部分的中点,垂直于气管纵轴方向,将相邻软骨环之间的韧带剪断,使之成为无载荷状态的独立气管环,按顺序盛放在装有生理盐水的培养皿中,将培养皿放在扫描仪上直接扫描, 从而将无载荷状态气管环的几何信息数字化存储在计算机中。取得信息后,将气管环自扫描仪上取下,从气管环肌肉部分中点剪开,从而得到零应力状态下气管扇形体,将其放回培养皿中,静置20min,待其形态稳定后,再放回扫描仪进行扫描,从而取得零应力状态下气管环的数字几何信息(图1)。最后,运用专用图像分析软件处理扫描所得图像, 测得无载荷状态气管环和零应力状态气管扇形体的内、外壁弧长以及张开角等几何尺寸。
1.4 统计分析:数据经SPSS13.0软件包进行统计分析,采用单因素方差分析,组间两两比较采用Q检验(Newman-kueuls法)。采用均数±标准差(x±s)来表示,P<0.05为有统计学意义。
2结果
2.1 形态学观察:如图1所示,分别为各组无载荷状态下犬气管环扫描图像和各组零应力状态下犬气管扇形体扫描图像。A组为新鲜气管组,B组为深低温冷冻组,C组为改良Courtman法气管黏膜脱细胞组。其中圆弧部分为气管环的软骨,直线部分为肌肉部分。剪开前大体观察可见各组样本大小、形态相近,无明显结构异常。
2.2 气管的张开角:检测各组犬气管零应力状态下扇形体,分别测量其内壁中点与两端点连线所成的张开角。结果见表1。检测数据采用均数±标准差(x±s)表示,组间两两比较采用Q检验。
结果(表2)示:新鲜气管组张开角为103.632°±11.695°,深低温冷冻法脱细胞组的张开角38.889°±11.814°,改良Courtman法脱细胞组张开角为72.332°±14.8258°,组间两两比较均有统计学差异(P<0.01)。由此可初步推断,采用这两种方法进行脱细胞处理对气管的生物力学性能均会产生负面影响,而采用改良Courtman法进行脱细胞处理对气管力学性能的负面影响较冷冻方法来讲对小一些 ......
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