大学生痤疮的病原学调查分析(2)
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2.3 PCR样本的检测：用摸索的最佳PCR反应参数对55份样本进行PCR检测，痤疮丙酸杆菌的PCR阳性率为90.91%(50/55)(见图1)、金黄色葡萄球菌的PCR阳性率为72.73%(40/55)(见图2)，阴性对照组痤疮丙酸杆菌PCR阳性率为5.00%(2/40)、金黄色葡萄球菌PCR阳性率为12.50%(5/40)。
2.4 PCR产物的测序： 测序结果经DNAMAN生物软件比对分析表明，测序序列与金黄色葡萄球菌全基因组序列(NO：NC_002758)和痤疮丙酸杆菌(NO：NC_006085)中16S rRNA对应序列的同源性均大于99%，说明PCR扩增结果真实可靠。
2.5 统计学分析结果：三种病原与大学生性别、地域来源统计学数据分析表明，螨虫感染率高低与大学生来源地(疆内外)有统计学差异(见表2)，但与性别无相关性；痤疮丙酸杆菌、金黄色葡萄球菌感染率高低与大学生来源地、性别无统计学差异。SPASS分析表2数据表明，χ2=6.799， P<0.05，故有统计学差异。
3 讨论
痤疮是由多种因素引起的常见慢性毛囊、皮脂腺炎症性皮肤病，临床表现为粉刺、丘疹、脓疱、结节、瘢痕等，好发于面、背、胸等富含皮脂腺的部位。目前研究认为，痤疮的发病机制与以下原因有关[8]：毛囊皮脂腺导管开口处角化过度、皮脂分泌过多、痤疮丙酸杆菌、金黄色葡萄球菌、螨虫、马拉色菌等内源性细菌的异常繁殖引起炎症反应，但本实验对病原学的分析表明，严重型或中等严重型痤疮患者痤疮丙酸杆菌的感染率为90.91%，金黄色葡萄球菌的感染率为72.73%，螨虫感染率为23.63%，说明中度、重度或重度集簇性痤疮病原感染有一定关系。另外，在本研究中发现：①痤疮患者螨虫感染率高低与疆内外大学生有统计学差异，可能的原因为新疆深居内陆，极端干燥的大陆性气候影响了螨虫人-人间的传播机会；②痤疮阴性对照组痤疮的检出率为12.50%，与陈双双等[9]报道的13.29%基本一致。
金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌是机体的正常菌群。正常菌群是指存在于正常人的体表和同外界相通的腔道(如口腔、肠道等)寄居的不同种类和数量的微生物[10]。在本研究中，采集的阴性样本先要进行外科无菌处理，再从鼻翼分泌物中获得，从而降低或去除正常菌群对PCR阳性结果的污染。本实验针对痤疮丙酸杆菌和金黄色葡萄球菌，设计多对引物，通过对PCR反应条件的不断摸索，最终用同一PCR反应参数和反应条件对这两种病原达到扩增的目的。由于两种细菌扩增的PCR产物大小分别为854bp和1528bp，从而能够很好地区别。由于PCR方法具有准确、快速、重复性好、易于推广等特点，该方法对于临床检验及推广应用具有潜在价值。
[参考文献]
[1]叶冬青.皮肤病流行病学[M].北京:人民卫生出版社,2001:363.
[2]张学军.皮肤性病学[M].南京:江苏科学技术出版社,2010:176.
[3]马 勇，黄丽群，汪 敏，等.痤疮患者心理健康调查研究[J].中外健康文摘，2008，5(7)：22-23.
[4]齐显龙，卢涛，高天文.痤疮丙酸杆菌相关疾病[J].中国美容医学，2005，14(4)：515-517.
[5]闵 莉，李灿东，蔡东华.不同年龄青少年痤疮发病流行病学调查[J].甘肃中医学院学报，2008，25(1)：27-29.
[6]袁 俐.病原生物学与免疫学实验教程[M] ......
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