机械张应力对PLGA-胶原复合支架上大鼠成肌细胞桩蛋白表达变化的影响
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邹蕊 宋锦璘 赵志河 西安交通大学附属口腔医院正畸科;重庆医科大学附属口腔医院正畸科;四川大学华西口腔医学院正畸科;
【摘要】目的:研究不同时间、不同强度的张应力对三维支架复合培养的大鼠成肌细胞桩蛋白paxillin表达的影响,探讨机械张应力刺激作用下复合培养成肌细胞早期力学信号转导机制。方法:首先,利用电纺法制备PLGA(polylactide-co-glycolide)-胶原复合生物支架,并与大鼠成肌细胞复合培养;然后,应用四点弯曲细胞力学加载装置对其进行力学加载,收集细胞,采用免疫印迹(Western Bloting)法,研究周期性单轴机械张应力刺激下PLGA-胶原复合支架上大鼠成肌细胞磷酸化桩蛋白p-paxillin(Tyr 118)/paxillin的表达变化。结果:无论1000μstrain或2000μstrain的张应力刺激,均可诱导paxillin的磷酸化过程,且随加载时间延长,磷酸化程度上调;2000μst rai n的张应力较1000μstrain激活paxillin磷酸化过程的效应更明显、迅速。结论:①周期性单轴牵张应变可以在加载早期通过Tyr118位点的磷酸化而激活桩蛋白paxillin;②周期性牵张应变对复合培养成肌细胞paxillin蛋白表达的影响,与应力刺激的力值有关。
【关键词】 张应力 成肌细胞 桩蛋白 力学转导机制
【基金】陕西省自然科学基金(2009JM4026) 西安交通大学口腔医院青年基金项目
【分类号】R363
基础研究ECM-整合素-细胞骨架蛋白所构成的局部粘着斑复合物是整合素信号转导的结构基础。细胞骨架蛋白参与粘着斑的形成。桩蛋白作为一种信号结合蛋白(signal adaptorprotein),主要存在于粘着斑,在多种细胞外刺激引起的细胞信号转导中发挥作用[1]。研究证实,整合素、细胞骨
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