湿性脂肪干细胞辅助自体颗粒脂肪移植术临床观察(2)
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4 讨论
2009年，Yoshimura等从实验研究获得到大量SVF细胞，并发现如果从大量吸脂抽吸物中获得ADSCs，细胞量足以应用到临床而无需进行细胞扩增，从200ml抽吸物中就可以获得1～10亿有核细胞，其中至少有10%是新鲜ADSCs[10]；同期开始采用CAL技术将自体颗粒脂肪中新鲜分离的SVF与颗粒脂肪注射填充移植物混合，提高了颗粒脂肪填充移植物中ADSCs细胞比例，取得了不错临床效果[11]。2010年，Brown等研究结论：通过吸脂术获得颗粒脂肪内SVF“微粒”含有多种类型多功能干细胞，其中就包括ADSCs，不需额外处理，SVF可直接自然混合在颗粒脂肪注射移植填充物中，对颗粒脂肪混合填充物较少的人工处理，更能改善脂肪细胞、ADSCs、SVF的活性，额外的人工处理纯化方法与以上三种细胞数量和活性无关[12]。采用自然静置悬浮不漂洗法，不离心浓缩纯化去除吸脂抽吸物液体和脂质部分，因其内含有大量可为脂肪组织工程所利用的ADSCs和SVF，湿性CAL移植后颗粒脂肪组织能否成活， 除受局部和全身因素(如供区与受区的部位及血运条件、体质与营养等)影响外，新鲜ADSCs和SVF与湿性CAL后受区脂肪组织局部血液循环及时有效建立密切相关[13]。2010年，付冰川和高健华等实验研究结论：新鲜SVF与培养的ADSCs一样，也能分泌血管内皮生长因子，参与血管化过程，可提高移植脂肪存活率，前者操作方便、安全、高效，后者难以满足临床需要[14]。2011年，鲁峰临床应用新鲜获得SVF，不体外分离培养ADSCs和SVF，一次完成手术(湿性CAL)，临床治疗11例，结论为新鲜干细胞辅助能提高游离移植脂肪组织存活率，是一种安全有效治疗软组织缺损方法[15]。有学者认为湿性CAL缺少自体ADSCs和SVF提取过程，其实湿性CAL是不采用离心浓缩纯化，不去除吸脂抽吸物内液体和脂质部分和不体外分离提取其内含有的大量新鲜ADSCs和SVF，更不需体外分离培养ADSCs和SVF，直接采用自然静置悬浮不漂洗法，新鲜ADSCs和SVF“微粒”直接自然混合在颗粒脂肪填充物中注射移植；临床任一次CAL操作，采用湿性CAL或干性CAL体外离心纯化分离培养前，二者所含新鲜ADSCs和SVF数量上绝对相同，但湿性CAL细胞活性却无因体外分离培养而可能产生的任何不可预知损害和问题；目前湿性CAL临床技术基本成熟，有20余年传统单纯自体颗粒脂肪(干性/湿性)注射填充移植经验可借鉴[16-18]。湿性CAL操作简易、快速、安全、经济、并发症少、一期完成，是未经离心分离浓缩纯化的颗粒脂肪与未体外分离培养的新鲜ADSCs和SVF“微粒”混合填充物复合同步移植，经过循证医学严格临床对照研究和检验，关键是可避免体外离心浓缩纯化及分离提取培养ADSCs和SVF过程中可能出现的细胞基因变异及瘤化问题，规避了许多体外培养细胞移植伦理道德方面问题，湿性CAL是一项安全有效的干细胞治疗方法，但要真正建立公认规范标准化临床操作流程，仍需做更多改进，如果干性CAL效果并不优于湿性CAL，那我们一定会更愿意选择操作简便效果安全可靠的湿性CAL[19]。2011年，Btti G等经长期临床验证，结论是注射移植的颗粒脂肪细胞其吸收、存活情况与脂肪离心浓缩分离纯化技术无关，而与不同部位供区脂肪的解剖和生理特性及受区具体实际情况有关[20]。相反对颗粒脂肪混合填充物越少的体外离心纯化人工处理，细胞活性却能得到越大的改善，以最大程度保护颗粒脂肪及新鲜ADSCs和SVF“微粒”免受损伤[21]。2009年李劼和高健华等实验研究结论：在体内ADSCs能够分化为血管内皮细胞并促进游离移植脂肪组织再血管化，提高脂肪组织存活率并减轻纤维化[22]。迄今学者们对干性CAL和湿性CAL仍持有不同观点，但为获得预期移植效果，保证良好血运和尽量减少损伤，却已形成共识，因血运状况及损伤程度均对移植效果产生直接影响；湿性CAL术后，血运重建是移植脂肪组织再生基础，脂肪细胞存活率及存活时间影响因素很多，其中最大限度减低颗粒脂肪损伤和受区尽早及时建立有效血运循环是关键[23]。湿性CAL注射至肌内不同层次，每层注射较少的颗粒脂肪，可以保证每个颗粒脂肪都有血供包围营养，更容易存活，单位面积颗粒脂肪的血供越丰富，越有利于颗粒脂肪存活，单点微量、多点、多平面、多隧道、无创钝针线状在形成隧道同时边退针边注射，将颗粒脂肪和干细胞“微粒”定位于受植床内，现已成为主流的颗粒脂肪注射填充移植方法[24-25]。为使注射移植后颗粒脂肪能够存活，血运重建机制是组织工程化颗粒脂肪组织成功构建的决定性因素，湿性CAL有效性和安全性仍需大样本临床人体应用进一步远期观察，以确定其长期安全和高效[26]。CAL未来重点应放在多量自体颗粒脂肪移植治疗方面，目前湿性CAL应是现阶段注射隆乳术、隆臀术、隆乳假体取出后即刻注射隆乳术、美容性丰全面术、全面部皮下软组织萎缩症、半面软组织萎缩症、外伤或先天发育不良所致体表软组织缺损、体表软组织凹陷、体表凹陷瘢痕畸形、肢体不对称、乳房不对称、臀不对称、吸脂过度致大面积脂肪缺失、皮肤表面形态不规则等多量自体颗粒脂肪注射填充移植美容和治疗方面首选技术[27]。湿性CAL注射移植前，受区先局部肿胀浸润使各层次组织液压膨胀和蔬松无创分离，即在受区局部肿胀浸润呈现一个“生理湿性内环境”，使注射移植混合填充物微粒易自行弥散开，不易形成脂肪结节，同时又对体表软组织凹陷及扁平小乳房等受区部位起到一定的术中即时预扩张作用[28]。湿性CAL单次注射即可完成，无需重复注射填充移植，初步解决了颗粒脂肪单次注射移植量和颗粒脂肪存活率是制约多量颗粒脂肪注射移植技术开展的重要难题；截止目前 ......
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