EdU体外标记人脂肪干细胞的实验研究
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2013年1月1日
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张怡 王克明 李发成 王淑杰 李太颖 刘新海 刘美辰 赵小晖 马继光 北京协和医学院中国医学科学院北京整形外科医院特需医疗部;
【摘要】目的:体外培养人脂肪干细胞(adi pose-deri ved st em cel l s,ADSCs)并行EdU标记,并通过测试标记率及标记后对细胞增殖分化的影响确定优化的标记时间及浓度组合。方法:使用分别采5μM,10μM,20μM,50μM的浓度及12h,24h进行标记标记ADSC,并以流式细胞仪精确测定标记率。挑选出各12h及24h时优化标记浓度,并进行标记后测定细胞活性,增殖及诱导分化实验。结果:P3代细胞约90%以上表达表面标记CD90+,CD105+,CD44+。基本不表达细胞表面标记CD45+,CD35+。通过各试验,得出最适浓度组合10μM,12h,对进一步研究脂肪干细胞在辅助脂肪移植中的作用具有指导意义。结论:EdU是标记方法简单有效,体外最佳标记浓度组合是10μM,12h。
【关键词】 脂肪干细胞 细胞治疗 EdU 干细胞标记 细胞示踪
【分类号】R329
人脂肪干细胞是存在于脂肪组织中的间充质干细胞,具有多向分化的潜能。脂肪干细胞来源广泛且易获取,在临床上吸脂手术后废弃的脂肪数量巨大,使用酶可以将脂肪干细胞分离出来[1-2]。脂肪干细胞应用广泛,其促血管化能力强及具有内分泌功能的优点可使其广泛用于细胞治疗、基因治
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