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编号:12662938
烧伤后大鼠不同骨骼肌凋亡相关蛋白的转录表达变化(2)
http://www.100md.com 2014年4月15日 中国美容医学2014年第8期
     5'--AGA,TCC,ACA,ACG,GAT,ACA,TT-3'。1.3 制作烧伤动物模型:试验前12h禁食,自由饮水。复方氯胺酮(0.1mg/kg)腹腔注射麻醉,脱毛器背部体侧脱毛。麻醉满意后,100℃沸水持续12s,造成大鼠背部30%Ⅲ度烫伤(以下简称烧伤),烧伤深度经病理证实。立即腹腔注射生理盐水40ml/kg复苏。将大鼠置于代谢笼观察。

    1.4 动物分组:随机分成5组,分别为处理后6h、1天、3天、7天及14天组,每个时间点设正常对照12只,烧伤大鼠每个时间点24只,活杀取材。

    1.5 标本采集及处理:严格无菌、无创游离大鼠伸趾长肌和比目鱼肌,新鲜标本分别进行骨骼肌充氧离体孵育、液氮保存和4%多聚甲醛固定。孵育液体-70℃冰箱保存。

    1.6观察指标:本研究采用RT-PCR方法测定骨骼肌组织Akt、Bcl-2、Caspase-3转录水平的表达变化。三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)为稳定表达的看家基因,被选择作用内参,以目的基因与内参对照表达间的比值反映目的基因表达的相对含量。结果采用Alpha Innotech Corporation公司的Alpha Easy FC软件进行图像分析。

    1.7统计学处理:所有数据均以x±s表示,统计学处理采用SPSS12.0软件进行t检验、方差分析 ......
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