CD44v3和CD44v5在口腔黏液表皮样癌中的表达及临床意义(2)
1.2.2 免疫组化染色：①采用二甲苯进行蜡切片脱蜡，并以梯度酒精充分脱去样本中的水分，充分脱水后采用清水及封闭液冲洗10min，并采用柠檬酸高压修复样本，持续2min；②以PBS缓冲液冲洗样本3min，并反复冲洗3次，冲洗后于每份样本中加入50μl一抗，并将处理的样本置于4℃试验箱恒温过夜；③将样本取出，并用PBS缓冲液持续冲洗5min，并连续冲洗3次，冲洗完成仔细吸除样本表面残留的PBS缓冲液，并在每份样本中滴加50μl 放大剂(鼠或兔)，室温孵育10min；④用PBS缓冲液持续冲洗样本3min，并连续冲洗3次，冲洗完成仔细吸除样本表面残留的PBS，并在每份样本中滴加50μl多聚酶结合物，于室温下持续孵育10min；⑤用PBS缓冲液持续冲洗样本3min，并连续冲洗3次，冲洗完成仔细吸除样本表面残留的PBS缓冲液，并在每份样本中滴加50μl新鲜配制的DAB溶液，并将样本置于显微镜下仔细观察3～5min，用自来水反复冲洗样本后，用苏木素对样本进行复染，采用0.1% HCl分化样本，并用氨水将样本返蓝；⑥采用梯度酒精充分脱去样本中的水分并干燥后 ......
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