皮肤组织块培养获取原代细胞的实验观察

http://www.100md.com 2015年3月15日 中国美容医学2015年第6期

     【摘要】目的：从皮肤组织块培养获取原代细胞。方法：将皮肤组织块修剪成2mmX 2mm大小，放置到培养皿中，真皮层向下，观察细胞爬出的情况。结果：组织块培养第3天，有角质形成细胞从组织块爬出，第7天左右组织块周围出现黑素细胞，随着培养时间的延长，组织块周围出现大量成纤维细胞。结论：在组织块培养过程中，早期可以收集较纯的角质形成细胞，含血清的DMEM培养20d后，可以得到大量成纤维细胞。

    【关键词】组织块培养；原代细胞；前体细胞

    【中图分类号】Q813.1 【文献标志码】A 【文章编号】1008-6455(2015)06-0034-03

    皮肤原代细胞的获得与培养对于基础和临床研究有着重要的意义。然而，通过中性蛋白酶和胰酶消化将表皮细胞游离，然后进行细胞的贴壁培养，继而经差别胰酶消化将细胞纯化，得到的角质形成细胞容易受到成纤维细胞的污染。在本实验中，通过皮肤组织块的培养方法，通过不同细胞从组织块爬出的时间不同，探索获得原代细胞的方法。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 包皮：包皮环切术中的包皮组织(提供者为18岁健康男性)

    1.1.2 试剂：中性蛋白酶(sigma) ......