维甲酸对增生性瘢痕动物模型生物性状的影响(2)
1.2.2细胞培养：细胞培养材料取自动物模型上切下的增生性瘢痕组织。取下的组织在无菌间用含100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素的PBS缓冲液反复冲洗3次，然后用无菌眼科剪刀将组织剪成0.5～1mm3大小的小块，接种于含20%小牛血清(FBS)的DMEM培养液中，在37℃，5%(体积分数)的CO2孵箱中培养，1周换3次培养液，待3周后细胞从组织块中长出并融合成致密的单层后用0.25%胰蛋白酶消化，按1：4传代，药物实验所用细胞为3～8代，其余细胞用冻存液保存以备后用[13]。
1.2.3MTT比色法：将对数生长期的成纤维细胞(FB)制成5×104悬浮液接种于96孔培养板中，100μl/孔，置于37℃，5%的CO2饱和温度下孵育24h，待细胞完全铁壁后去上清液，分别加入浓度为1×10-6mol/l、1×10-5mol/l、1×10-4mol/l、1×10-3mol/l的维甲酸和10%小牛血清的DMEM 200μl，培养后每组设4个平行孔及空白对照孔 ......
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1.2.3MTT比色法：将对数生长期的成纤维细胞(FB)制成5×104悬浮液接种于96孔培养板中，100μl/孔，置于37℃，5%的CO2饱和温度下孵育24h，待细胞完全铁壁后去上清液，分别加入浓度为1×10-6mol/l、1×10-5mol/l、1×10-4mol/l、1×10-3mol/l的维甲酸和10%小牛血清的DMEM 200μl，培养后每组设4个平行孔及空白对照孔 ......
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