不同年龄大鼠脂肪组织移植后存活率比较研究(3)
除毛细血管计数外,所有指标按0到5分分级评分,半定量化:0,几乎无;1,极少出现(<25%);2,极少到中等(25%~50%);3中等(50%~75%);4中等到广泛(>75%);5,几乎全部。
1.2.4.2 Perilipin免疫荧光染色切片观察:脂滴包被蛋白(Perilipin)作为一种重要的脂肪代谢相关蛋白包被于脂滴的表面。Perilipin免疫荧光染色是目前最可靠的、特异性染色有活性的脂肪细胞的方法,且染色后良好的显示脂肪细胞的形态[5]。应用正置全自动荧光显微镜观察移植物的perilipin免疫荧光染色切片,在绿色激发光源下观察:①存活的成熟脂肪细胞计数:在每张组织切片内,随机选取5个放大400倍的视野,对perilipin阳性、直径小于20μm的成熟脂肪细胞计数(个/HPF),取平均值;②应用Imge-Pro Plus 6.0图像分析软件,计算所有样本组织切片内脂肪细胞存活区域(即perilipin阳性区域)面积比。使用脂肪移植物存活指数[5]来评估脂肪移植物的存活情况,脂肪移植物存活指数=存活脂肪面积比×样本体积/移植前体积 ......
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1.2.4.2 Perilipin免疫荧光染色切片观察:脂滴包被蛋白(Perilipin)作为一种重要的脂肪代谢相关蛋白包被于脂滴的表面。Perilipin免疫荧光染色是目前最可靠的、特异性染色有活性的脂肪细胞的方法,且染色后良好的显示脂肪细胞的形态[5]。应用正置全自动荧光显微镜观察移植物的perilipin免疫荧光染色切片,在绿色激发光源下观察:①存活的成熟脂肪细胞计数:在每张组织切片内,随机选取5个放大400倍的视野,对perilipin阳性、直径小于20μm的成熟脂肪细胞计数(个/HPF),取平均值;②应用Imge-Pro Plus 6.0图像分析软件,计算所有样本组织切片内脂肪细胞存活区域(即perilipin阳性区域)面积比。使用脂肪移植物存活指数[5]来评估脂肪移植物的存活情况,脂肪移植物存活指数=存活脂肪面积比×样本体积/移植前体积 ......
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