胡亚暖，姚永明，张泽敏，张 帆，王 君，杨彪炳

    (1.潍坊医学院整形外科 山东 潍坊 261053；2.费县人民医院 山东 临沂 273400；3. 潍坊医学院整形外科研究所 山东 潍坊 261053)

    不同浓度EGF对兔ADSCs体外诱导分化为表皮细胞的实验研究

    胡亚暖1，姚永明1，张泽敏1，张帆2，王君1，杨彪炳3

    (1.潍坊医学院整形外科山东 潍坊261053；2.费县人民医院山东 临沂273400；3. 潍坊医学院整形外科研究所山东 潍坊 261053)

    目的：探究表皮生长因子(EGF)对兔脂肪来源干细胞(ADSCs)体外诱导分化为表皮细胞以及所需最佳浓度的实验研究，为组织工程在大面积皮肤缺损方面的研究提供进一步的理论依据。方法：取2个月龄健康新西兰大白兔的脂肪组织，体外分离、培养并传代ADSCs。实验分为诱导组和未诱导组，诱导组分别用5ng/ml、10ng/ml、20ng/ml的EGF进行干预，未诱导组用等量的生理盐水作空白对照。观察不同浓度的EGF对ADSCs诱导分化为表皮细胞的形态学变化，并于1周后对细胞进行免疫荧光及荧光定量PCR检测CK-19和整合素β(integrinβ)的表达情况。结果：光镜下显示诱导组细胞形态仍呈长梭形或多角形；免疫荧光结果显示诱导组(10ng/ml组)表皮细胞特异性标记物CK-19表达呈阳性，且其表达量明显高于其他组，未诱导组细胞呈阴性；荧光定量PCR结果显示诱导组(10ng/ml组)表皮细胞的特异性因子CK-19和integrinβ的mRNA表达量均明显高于其余组(P<0.01)。结论：表皮生长因子能够成功诱导兔脂肪来源干细胞定向分化为表皮细胞，且其最佳诱导浓度为10ng/ml。

    脂肪来源干细胞；表皮生长因子；表皮细胞；浓度

    Key worlds: adipose derived stem cells； EGF； epidermis cells； concentration

    大面积皮肤缺损是外科领域中的一项重大难题。目前，自体皮肤移植是治疗皮肤组织缺损的一种有效方法。然而，自体皮肤移植供区的皮肤来源有限，对患者的创伤较大，同时刃厚皮片存在不耐摩擦、缺乏弹性及易收缩等特点，中厚皮片又有瘢痕挛缩等问题。随着组织工程技术的发展，皮肤替代物的研究取得了实质性的进展。脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells，ADSCs)是从脂肪组织中分离出来的多能干细胞，经诱导后，可以向骨、软骨、脂肪、肌肉、血管内皮以及表皮细胞分化[1-2] ......