PLGA神经导管联合ADSCs与自体神经组织修复大鼠坐骨神经缺损的实验研究(2)
1.2.3神经组织雪旺细胞迁出实验和鉴定:将5~7d SD乳鼠颈椎脱臼处死,置于75%酒精中浸泡5min后,沿大腿后外侧入路,无菌条件下切开皮肤,分离肌肉,暴露并切取双侧坐骨神经,存放在冰板上的培养皿中,解剖显微镜下仔细去除神经外膜,PBS缓冲液反复冲洗3次。用组织剪将其剪碎至约0.5~1mm3大小置于培养皿中,加入适量含10%FBS的DMEM培养基,使培养基刚好浸没组织块,置入含5%CO2的37℃培养箱培养,24h后待组织块基本牢固的贴附在培养皿底部时追加培养基,每日观察。每48h换液一次。待组织块周围细胞长满后,将组织块转移至新的培养皿中继续培养,迁移出的雪旺细胞消化、纯化后行S100染色鉴定。
1.2.4 PLGA神经导管的预处理:动物实验进行的前一天,取真空包装的无菌PLGA神经导管,用含体积分数为10%胎牛血清的培养基预置24h,以增加细胞黏附性,备用。
1.2.5实验分组及神经导管制备:SD大鼠32只,随机分为4组,每组8只。B,c组填充的自体神经来源于切除的坐骨神经 ......
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1.2.4 PLGA神经导管的预处理:动物实验进行的前一天,取真空包装的无菌PLGA神经导管,用含体积分数为10%胎牛血清的培养基预置24h,以增加细胞黏附性,备用。
1.2.5实验分组及神经导管制备:SD大鼠32只,随机分为4组,每组8只。B,c组填充的自体神经来源于切除的坐骨神经 ......
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