磁性前列地尔脂微球靶向治疗大鼠腹部皮瓣缺血再灌注损伤的基础研究(2)
1.3 仪器：激光多普勒血流仪(日本，Omega)；4℃冰箱(青岛，澳柯玛)；-80℃冰箱(青岛，海尔)；普通光学显微镜(德国，Leica)；荧光倒置显微镜(德国，Leica)；恒温水浴锅(深圳，深信)；高速离心机(美国，Beckman)。
1.4 方法
1.4.1 前列地尔脂微球制备：采用乳化热固化技术。取牛血清白蛋白250mg溶于10g/L前列地尔蒸馏水溶液中，添加磁流体0.2ml，与100ml含10%的蓖麻油混合，搅拌10min，超声乳化；另取蓖麻油100ml加热至160℃，在搅拌下加入上述乳浊液，160℃保温10min，搅拌6h；加入乙醚200ml脱脂，离心，弃去油相，沉淀依次用乙醚、乙醇漂洗，最后置换在蒸馏水中，冷冻干燥48h，即成微球粉末[2]。
1.4.2 大鼠腹部島状皮瓣模型制备：实验动物术前1d禁食，10% Na2S将腹部脱毛备用，3%戊巴比妥钠(40mg/kg)腹腔内注射进行全身麻醉，参照Manson等[3]的方法设计以腹壁浅血管为蒂的3cm×6cm大小的岛状皮瓣，常规消毒后于皮下内膜层掀起皮瓣备用。
1.4.3 实验方法：皮瓣制备完成，用微血管夹夹闭腹壁浅动脉以阻断血流，使皮瓣缺血；5h后取下微血管夹，使皮瓣再灌注，同时经对侧股动脉插管，实验组注射磁性前列地尔脂微球，并在皮瓣外覆盖铷铁硼稀土磁铁；对照组注射生理盐水；空白组仅制备腹部岛状皮瓣，不进行血管阻断及药物注射。前列地尔脂微球及生理盐水注射首次剂量为20mg/kg ......
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1.4 方法
1.4.1 前列地尔脂微球制备：采用乳化热固化技术。取牛血清白蛋白250mg溶于10g/L前列地尔蒸馏水溶液中，添加磁流体0.2ml，与100ml含10%的蓖麻油混合，搅拌10min，超声乳化；另取蓖麻油100ml加热至160℃，在搅拌下加入上述乳浊液，160℃保温10min，搅拌6h；加入乙醚200ml脱脂，离心，弃去油相，沉淀依次用乙醚、乙醇漂洗，最后置换在蒸馏水中，冷冻干燥48h，即成微球粉末[2]。
1.4.2 大鼠腹部島状皮瓣模型制备：实验动物术前1d禁食，10% Na2S将腹部脱毛备用，3%戊巴比妥钠(40mg/kg)腹腔内注射进行全身麻醉，参照Manson等[3]的方法设计以腹壁浅血管为蒂的3cm×6cm大小的岛状皮瓣，常规消毒后于皮下内膜层掀起皮瓣备用。
1.4.3 实验方法：皮瓣制备完成，用微血管夹夹闭腹壁浅动脉以阻断血流，使皮瓣缺血；5h后取下微血管夹，使皮瓣再灌注，同时经对侧股动脉插管，实验组注射磁性前列地尔脂微球，并在皮瓣外覆盖铷铁硼稀土磁铁；对照组注射生理盐水；空白组仅制备腹部岛状皮瓣，不进行血管阻断及药物注射。前列地尔脂微球及生理盐水注射首次剂量为20mg/kg ......
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