具有皮肤美容应用潜能的透皮型弹性蛋白样多肽的制备(1)
[摘要]目的：设计、制备透皮型弹性蛋白样多肽(elastin-like polypeptide， ELP)融合蛋白，探索其作为皮肤美容制剂的潜能。方法：设计具有透皮特性的蛋白转导功能域(protein transduction domain， PTD)和ELP融合蛋白PTD-ELP，联合密码子优化、重叠延伸PCR和定向递归连接等技术构建其原核表达载体。在此基础上将该载体转化至大肠杆菌中，进行异丙基硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-Thiogalactoside， IPTG)诱导表达并对目标蛋白的亚细胞定位和可溶性进行分析。结果：成功构建了携带PTD-ELP读码框架的原核表达载体，携带该载体的大肠杆菌在IPTG诱导5h时PTD-ELP融合蛋白的表达量达到峰值，约占菌体总蛋白的23.6%；亚细胞定位分析表明PTD-ELP融合蛋白主要以包涵体形式在胞内表达 ......
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