3 讨论

    目前，对婴幼儿血管瘤的增殖和消退的确切机制尚不清楚[7-9]，组织病理学证实血管瘤是以血管内皮细胞增生为主与成纤维细胞、周细胞、脂肪细胞等多種细胞构成的良性肿瘤。从细胞水平、生物分子水平研究婴幼儿血管瘤的发病机制，需要有高效的方法分离获得高纯度的内皮细胞。本次实验采用的组织法与消化结合法，经流式细胞仪分选再培养可得到较高纯度的内皮细胞，有效去除组织中杂细胞，并通过细胞形态，细胞表面标记物免疫荧光鉴定，细胞表面标记物流式细胞鉴定为血管瘤内皮细胞。

    培养原代细胞方法主要有消化法和组织块法[10-11]，消化法容易获得细胞但是血管瘤内皮细胞和杂细胞混合在一起不宜纯化；组织块法可得到纯度高的细胞易于纯化，但是得到细胞数量较少，细胞游出时间长，采用消化法和组织块法结合可取得较好的效果[12]。然而，在血管瘤内皮细胞培养过程中最关键的就是去除杂细胞对细胞进行分离、纯化。常用的分离纯化的方法有磁珠分选法[13-14]、流式分选法、酶消化法、机械刮除法[15]、差速贴壁法[16]等，机械刮除法和相差速贴壁法因过程较复杂目前较少用 ......