浅层电子线放射治疗背部瘢痕疙瘩的体外实验与临床疗效观察(2)
1.2.2 瘢痕疙瘩成纤维细胞培养:标本取自笔者科室住院患者,女1例,年龄25.8岁,位于后背部,经病理诊断确诊为瘢痕疙瘩,签署知情同意书。手术获得瘢痕疙瘩标本,组织块培养法培养成纤维细胞,培养在DMEM培养液(含体积分数10%的胎牛血清和双抗溶液)中。0.25%胰蛋白酶消化传代,选取培养的第3代KFs用于实验。1.2.3 MTT检测电子线照射后KFs增殖:用含10%胎牛血清的培养液配成单个细胞悬液,以每孔1 000~10 000个细胞接种到96孔板,每孔体积200ul。按照单次照射剂量将KFs分为7组,每组设3个复孔,每组均设空白对照(不进行电子束照射)。分别用Varian clinic 21EX医用直线电子照射仪产生的6MeV电子线进行照射,照射深度为1cm(使6MeV电子线的最高照射剂量点落于细胞上)。单次照射剂量分别为1Gy、1.5Gy、2Gy、2.5Gy、3Gy、3.5Gy、4Gy,隔日照射,共照射6次,总剂量控制在6~24Gy。培养的细胞经浅层电子束照射后,继续培养8h,MTT法检测细胞增殖,光学显微镜下观察细胞形态变化并拍照。
1.2.4 治疗过程:将120例患者按照单次照射剂量分为四组,每组30例,所有患者先行手术切除瘢痕疙瘩 ......
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