阻断Notch信号的角质形成细胞对成纤维细胞增殖及分泌功能的影响研究(1)
阻断Notch信号的角质形成细胞对成纤维细胞增殖及分泌功能的影响研究,复合培养模型,KGF,TGF-β1
[摘要]目的:探讨在复合培养的条件下,将阻断Notch信号后的角质形成细胞与成纤维细胞共培养,对成纤维细胞增殖及表达角质细胞生长因子(Keratinocyte growth factor, KGF)、TGF-β1的影响。方法:运用角质形成细胞-成纤维细胞复合培养的模型,于复合培养前3d进行血清刺激或者γ-分泌酶抑制剂(DAPT)阻断角质形成细胞中的Notch信号,即在角质形成细胞分化前进行干预。然后提升至气液交界面使其达到复层生长和终末分化,后与成纤维细胞共培养,观察阻断Notch信号后的角质形成细胞对成纤维细胞增殖及分泌功能的影响。结果:分化前,给予角质形成细胞血清刺激,复合培养0h,Notch-1、Jagged-1表达明显升高(P< 0.05);复合培养第1天,P21表达上调、P63表達下降(P< 0.05)。血清刺激前给予DAPT预处理,复合培养0h,角质形成细胞中Notch信号下游分子P21和P63的表达恢复至无血清刺激水平(P< 0.05)。DAPT组的成纤维细胞增殖能力、KGF及TGF-PW表达相对于血清刺激组明显被抑制(P<0.05),而与无血清组比较 ......
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