苦参碱对瘢痕疙瘩成纤维细胞生长的抑制作用实验研究(2)
1 材料和方法1.1 标本和材料:收集了8例沈阳军区总医院整形外科手术切除的瘢痕疙瘩。其中男性3例,女性5例;年龄10~42岁;耳廓部位4例,下颌部2例,前胸部2例;瘢痕疙瘩取材标准:凸出于皮肤表面、无破溃和感染、且既往未经手术和激光等治疗。标本选取均获得患者的知情同意,并经过医院伦理委员会审批。苦参碱(中国药品生物制品检定所提供标准品,使用NaCl配制),四甲基偶氮唑藍[MTT,3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide, Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide](Sigma,美国)、PI(Propidium Iodide)染料、Hoechest 33258染料(江苏碧云天生物技术公司,中国);DMEM培养基(invitrogen,美国);胎牛血清(天津灏洋生物制品有限公司,中国);相关抗体:CDK4、CDK6、LC3、Beclin-1、Bcl-2、Bax和GAPDH(Santa ......
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