miR-21调控PTEN/PI3K/Akt通路抑制增生性瘢痕形成的机制研究(2)
1 材料和方法1.1 材料:正常人皮肤成纤维細胞(GM0639)和人增生性瘢痕成纤维细胞(hypertrophic scar fibroblasts,HSF),提取试剂盒(mirVana? miRNA Isolation Kit)、miRNA逆转录试剂盒(TaqMan? MicroRNA Reverse Transcription Kit)及miRNA定量检测试剂盒(TaqMan? MicroRNA Assays)、LipofectamineTM 2000脂质体均购自Invitrogen公司;总RNA提取试剂RNAiso Plus、qPCR试剂盒(SYBR?Premix Ex TaqTM)均购自TaKaRa;Dual Luciferase?Reporter Assay System购于Promega公司;RIPA蛋白裂解液、BCA蛋白定量试剂盒购自碧云天生物;胎牛血清、RPMI1640、Opti-MEM、青链霉素购自Gibco公司;PTEN购自CST;GAPDH和HRP标记二抗购自中杉金桥生物技术有限公司 ......
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