萝卜硫素通过下调Traf6/TAK1信号传导抑制UVB诱导黑素生成的机制研究(2)
1 材料和方法1.1 主要材料:原代正常人皮肤黑素细胞PIG1(来源于上海ATCC细胞库);DMEM培养液、胎牛血清、胰蛋白酶(Gibco公司);CCK8试剂盒(Solarbio公司);RIPA裂解液(杭州四季青公司);BCA蛋白定量试剂盒(北京康为世纪);兔抗鼠MITF、TYR、TRP-1、TRP-2、Traf6、TAK1、p-TAK1及β-actin抗体(Abcam公司);羊抗兔IgG二抗(上海谷歌生物公司);ELC化学发光检测试剂盒(Advansta);优黑素试剂盒(上海江莱生物科技有限公司)。
1.2 主要仪器:BIORAD-550型酶标仪(美国伯乐公司);BBS-V800型单人超净台(山东鑫贝西公司);SPX-250型细胞培养箱(美国Thermo公司);GE-100型凝胶电泳仪(北京六一仪器厂);Amersham Imager 600仪器(BIO-RAD,美国)。
1.3 PIG1细胞培养:采用含5%胎牛血清的DMEM培养基(不含抗生素)对PIG1细胞进行培养 ......
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