1.3.5 miR-198对创面表皮干细胞生长周期的影响：在培养基中，取第2代表皮干细胞，以1.3×104cells/cm2的密度接种于六孔板中，接种后12h，胰酶消化六孔内细胞，制成单细胞悬液。细胞生长达到60%～70%融合时，0.25%胰蛋白酶消化制成单细胞悬液，加小鼠抗大鼠α6-integrin单克隆抗体，室温孵育30min，Buffer缓冲液洗涤2遍。加抗小鼠PE，室温避光15min，Buffer缓冲液洗涤2遍，流式细胞仪检测，观察miR-198高表达和抑制miR-198后对慢性创面表皮干细胞生长周期的影响。

    1.3.6 miR-198调控创面表皮干细胞的作用靶点分析

    1.3.6.1 SP法检测创面表皮干细胞FGFR1及其下游Ras和MAPK的阳性表达变化情况：各实验动物选取一张切片，采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶法，将样本依次采用二甲苯脱蜡、梯度乙醇脱水处理，滴加双氧水后进行抗原修复，依次加入一抗、二抗进行孵育，并严格按照说明书操作，最后DAB/双氧水显色后，再用苏木精复染，常规脱水、透明封片后进行观察。每组随机取5个视野，重复6次，每片于200倍镜下读取阳性细胞数，取平均值，用PBS代替一抗作阴性对照 ......