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编号:13423135
改良法处理人脱细胞真皮的脱细胞效果及其与体外细胞的相容性研究(2)
http://www.100md.com 2019年5月15日 《中国美容医学》 2019年第10期
     1 材料和方法

    1.1 材料:选取本院整形外科行常规皮肤移植术后多余的臀部皮肤组织作为皮肤样本,入选者年龄24~44岁,均无传染性疾病及皮肤病变等。本次研究经笔者医院伦理委员会批准。

    1.2 方法

    1.2.1 脱细胞真皮的制备[9]:①传统法:无菌状态下将所选皮肤组织的皮下脂肪减除,放入1mol/L的氯化钠溶液(上海玉博生物科技有限公司)中37℃作用24h,然后除去表皮,放入2%的氫氧化钠溶液中37℃进行摇床处理16h,使用链霉素磷酸盐缓冲液(PBS,上海远慕生物科技有限公司)将溶液冲洗至中性。将所得皮片按照-80℃冷冻、37℃水浴箱复温、洗涤,反复冻融4次,每次4h。完成后使用冷冻干燥机冻干,将所得脱细胞真皮4℃密封备用;②改良法:将所选皮肤组织的皮下脂肪组织在无菌状态下剪除,放入1mol/L的氯化钠溶液中37℃作用24h将表皮去除,然后放入2%的氢氧化钠溶液中45℃进行摇床处理4h,使用PBS将溶液冲洗至中性。进行冷冻干燥后4℃密封备用。

    1.2.2 染色:两种方法均先使用4%的多聚甲醛固定24h,再用石蜡包埋,然后进行切片、HE染色,用树脂进行封片,在显微镜下观察并拍照记录 ......
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