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脂肪干细胞对D-半乳糖致裸鼠皮肤老化的拮抗作用及对皮肤恢复功能的影响
http://www.100md.com 2020年4月11日 《中国美容医学》 2020年第1期
     1.3.4 检测指标:从每组裸鼠的注射区域取下0.5g的皮肤组织块。然后采用预冷的生理盐水冲洗组织块,并去除皮下脂肪和结缔组织,用滤纸擦干皮肤组织块。采用组织匀浆机(于冰水环境下)将皮肤组织制成10%的组织匀浆,反复溶解三次,直到细胞被完全破坏,所有成分均在液相状态进行分离。取各组的上清液进行与老化相关的生物标志物以及晚期糖基化终末产物的检测。具体操作步骤按照相应的说明书进行。采用硫代巴比妥酸法测定MDA,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD),ELISA法测定晚期糖基化终末产物(AGEs)、总胶原蛋白、Ⅰ型胶原蛋白及Ⅲ型胶原蛋白水平。

    取每组裸鼠的注射区域的皮肤组织块,将其制成切片。所有皮肤组织块切片均用HE染色、马松染色进行处理。比较各组皮肤组织真皮层厚度及胶原分布比,采用免疫组化测定各组CD31及血管内皮生长因子(VEGF)表达情况,VEGF工作溶液的稀释率为1:500,CD31工作溶液的稀释率为1:100。

    1.4 统计学分析:采用SPSS 19.0软件进行统计分析,计数资料用例数和百分数表示,计量数据用平均值±标准差(x?±s)表示,多组间计量资料比较采用单因素方差分析(One Way ANOVA),组间两两比较,若方差齐性 ......

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