1.2 样本量评估：应用两样本均数比较的评估方法：即n1=n2=2[(uα+uβ)/δ/σ]2+1/4uα2，按预实验中miR-34b的表达并查阅文献，拟正常皮肤组织中的表达量为2.2，瘢痕疙瘩中的表达量为1.1，二者的差值是1.1，如果σ=1.1，δ/σ=0.9，α=0.05，计算n1=n2≈42例。

    1.3 方法

    1.3.1 实时荧光定量PCR实验：应用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测miR-34b的表达，检测基于新鲜标本。miR-34b引物上游：5'-ATCGGCCCAAAGTGGTG-3'，下游：5'-ACAAACTGGACTCAGCTT-3'。以U6为内参，上游：5'-GGAACGAGAAAGATTAGC-3'下游：5'-TTGGAATTCACGAAATTCCG-3'。引物由苏州睿赢生物技术公司合成。严格按说明书进行操作。反应程序：95℃ 5min，1个循环;95℃ 25s，64℃ 20s，72℃ 20s，15个循环;93℃ 25s，60℃ 35s，72℃ 20s。共40个循环。60℃时采集信号，记录Ct值，通过2-ΔΔCt法计算目的基因。ΔΔCt=[Ct目的基因(未知样品)-CtGAPDH(未知样品)]-[Ct目的基因(校正样品)-CtGAPDH(校正样品)] ......