1.2 方法

    1.2.1 细胞培养及分组：手术中切除的瘢痕疙瘩标本置于50ml无菌离心管内并立即保存在冰盒中送往实验室。超净台内，使用无菌剪刀将瘢痕疙瘩组织表皮去除，真皮组织剪碎成约2mm大小，随后置于含有0.2% Ⅱ型胶原酶和10% FBS的DMEM培养基中，37℃恒温水浴锅震荡消化6h，待组织完全消化后，100μm无菌滤网过滤，过滤液1 000rpm离心5min，用5ml PBS重悬沉淀并再次离心，所得细胞接种于培养皿内常规培养(37℃，5% CO2)。实验中将4MU稀释至所需浓度(0mM、0.2mM、0.4mM、0.8mM)分别处理细胞。本研究所用细胞均为第3～6代细胞。

    1.2.2 细胞增殖检测：细胞消化离心后计数，每孔1.0×103个细胞种植于96孔培养板，含10% FBS培养基培养6h，细胞贴壁后，更换为含有不同浓度4MU的培养基继续培养。之后每隔一天使用CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况。具体方法为：弃去原有培养基，每孔加入100μl培养基和10μl CCK-8溶液 ......