1.2.6RNA-pulldown及免疫共沉淀实验验证H19与EZH2相互作用：天津生物研究所在体外合成了H19片段，并对其突变株H19MUT进行了截短。T7RNA聚合酶用于H19RNA的转录。生物素标记标记混合生物素标记H9RNA序列。DNA经RNAase游离DNA酶I消化，用RNeasyMiniKit纯化。在buffer(10mmol/LTris-HClpH7.0，0.1mol/LKCl，10mmol/LMgCl2)中加入1μg标记的RNA，加热至95℃，1min后移至冰育4min，室温静置30min。取正常人皮肤上皮细胞HIEC3UG，用细胞裂解液(Sigma，美国)在4℃下裂解1h。将裂解液在12000g和4℃下离心，将上清液转移到无核糖核酸酶的离心管中5min，在离心管中加入300个标记g的RNA，置于RIP缓冲液中于室温下孵育1h。然后再通过链霉亲和素琼脂糖珠纯化生物素进行标记后，用RIP缓冲液洗涤6次，收集洗涤液进行RT-PCR检测。加入5的缓冲液，在95℃下进行5min印迹试验 ......