唐强 黄志群 廖秋姣 陈端凯 陆钢 姜艳 唐乾利

    [摘要]目的：探讨骨髓间充质干细胞(Bone mesenchymal stem cells，BMSCs)的外泌体对表皮细胞(HaCaT细胞)增殖、侵袭与迁移的影响，以及对小鼠烧伤创面愈合的作用。方法：分离培养小鼠的BMSCs，超速离心法收集BMSCs来源的外泌体，采用BMSCs来源的外泌体培养HaCaT细胞，CCK-8法检测BMSCs来源的外泌体对HaCaT细胞增殖的影响，细胞划痕实验和Transwell实验检测BMSCs来源的外泌体对HaCaT细胞迁移与侵袭的影响。选取25只C57BL/6小鼠构建烧伤模型，22只成功建模，将存活小鼠分为对照组和外泌体组，每组11只，外泌体组烫伤周围注射BMSCs来源的外泌体，对照组小鼠同时注射等体积PBS溶液。采用Image J软件分析小鼠创面愈合率，通过HE染色观察创面组织学变化，采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测创面组织中炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)的水平，免疫组织化学染色检测创面组织Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)和Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)表达。结果：成功分离培养出小鼠BMSCs，并得到BMSCs来源的外泌体。与对照组比较，实验组HaCaT细胞增殖活性明显升高;细胞的划痕愈合率较对照组显著升高，细胞侵袭数目较对照组也显著增加，差异均具有统计学意义(P<0.05)。与对照组小鼠比较，经BMSCs来源的外泌体处理的小鼠，第3、7、14、21、28天的创面愈合率显著升高，创面组织结构得到明显改善，且组织中促炎因子TNF-α、IL-1β的含量均显著降低，而抗炎因子IL-10的含量显著升高，Ⅲ型胶原表达明显，差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论：BMSCs外泌体可促进HaCaT细胞的增殖、侵袭与迁移能力 ......