时间、激素、饮食、环境污染及太阳辐射等均可导致皮肤老化现象的发生

    。真皮胶原细胞外基质是维持皮肤力量和弹性的主要功能组织

    。胶原蛋白(Collagen)超家族一共被划分为8个家族，28种不同类型的胶原蛋白

    ，其中皮肤内部Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白最丰富，它们是皮肤真皮层细胞外最主要的基质(ECM)。Ⅰ型胶原占皮肤ECM的80%～85%，而Ⅲ型胶原占8%～11%

    。

    海洋大型藻类富含大量生物活性物质，其在中医中早已用于皮肤疾病的治疗，具有抗氧化、抗炎、抗菌及抗过敏等作用

    。课题组通过开发一种由褐藻(海带、墨角藻、巨藻)及小球藻以适宜比例组成的复合藻，发现其可以通过上调Sirt3表达，促进线粒体能量代谢水平，改善紫外线诱导的皮肤光老化

    ，但是该复合藻在对皮肤胶原蛋白含量及其修复皮肤屏障功能中的研究尚未明确，因此本研究通过采用D-半乳糖诱导小鼠皮肤衰老及D-半乳糖刺激的小鼠原代皮肤成纤维细胞损伤模型考察复合藻对小鼠皮肤胶原蛋白及其屏障功能的影响。

    1 材料和方法

    1.1 试剂：复合藻提取物[褐藻(海带、墨角藻、巨藻)及小球藻混合组成，成都丁因科技有限公司]；Sirt3抗体(abcom，美国)；Nrf2抗体(abcom，美国)；GAPDH抗体和辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔IgG(武汉博士德生物工程有限公司)；其他试剂均为国产分析纯。

    此外，邢孟志[14]从文字学、金石学视角出发提出，清初文字学、金石学家的研究，促使清代碑学运动自清早期开始萌芽，中期以阮元、包世臣为代表。扫尽帖学低眉柔靡之风、倡导碑学质朴雄强面貌的学术运动，仍是在篆隶书的领域展开的，而清代篆隶的复兴正是文字学、金石学研究的结果。碑学运动也是受文字学、金石学直接影响的产物，这一影响带来了书法理论和书法创作上审美取向的根本改变，这一改变丰富了书法创作的理论内容，拓展了书法创作的空间。

    1.2 仪器：二氧化碳培养箱(Sigma，公司)；生物洁净工作台(苏州安泰空气有限公司)；多功能酶标仪(Tecan Mpro200，瑞士)，Western blot电泳及化学成像系统(Bio-red，美国)。

    路基两侧需要进行加宽处理，方式为拼接，控制加宽宽度约为4.5 m。在对路基加宽处理时，首先将外围车道进行封堵，然后开始加宽部分的施工，在路基加宽施工期间，为了不给交通带来太大的压力，极可能保持双向车道可以通车，施工过程如图2所示。

    2.1 复合藻对D-半乳糖诱导的小鼠皮肤衰老模型含水量的影响：D-半乳糖干预可以导致小鼠皮肤水分发生明显损失 ......