瘢痕疙瘩是一种组织在创伤或感染后过度修复、纤维化的良性肿瘤，其病理进展与瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖、迁移、侵袭的调控异常有关

    。有研究表明，复方芪参提取物能够抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖，其作用机制可能与抑制Smad2连接区和Smad3连接区磷酸化有关

    。复方芪参提取物可能通过调控TGF-β/Smad信号传导通路抑制兔耳瘢痕增生

    。复方芪参提取物通过抑制肝纤维化和PAI-1mRNA的表达而阻碍肝细胞癌发展

    。但复方芪参提取物对瘢痕疙瘩成纤维细胞迁移侵袭和细胞周期的影响鲜有研究。故本次对此进行研究。

    拌和站的混合料拌和能力应与混合料摊铺速度相匹配，在沥青混合料摊铺时，应保证摊铺机前始终有4～5辆自卸卡车等待卸料。混合料在运输过程中，为防止温度下降过快，影响长大纵坡试验段路面摊铺、压实质量，最好在自卸式卡车上覆盖一层油毡布，同时尽可能加快车辆在运输时的速度，以减少混合料热量的散发。

    1 材料和方法

    1.1 材料：瘢痕疙瘩成纤维细胞(笔者医院外科手术切除的瘢痕组织离体标本)。

    1.2 药物和主要试剂：中药材丹参(安徽省亳州市药材市场)；DMEM培养基(Gibco，美国)；1%青霉素链霉素抗生素(Thermo Fisher，美国)；胰蛋白酶和10%胎牛血清(Thermo Fisher，美国)；辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗兔二抗(艾美捷科技，武汉)；RIPA裂解液、PVDF膜(ThermoFisher，美国)；BCA蛋白浓度测定试剂盒(碧云天，上海)；CO

    细胞培养箱(Thermo，美国)；MTT试剂盒(生物工程股份有限公司，上海)；兔抗人细胞周期蛋白1(Cyclin D1)抗体、VEGF抗体、MMP9抗体、p53蛋白抗体(Santa Cruz，美国)；BIO-RAD Powerpac Universal通用型电泳仪(伯乐，美国)。

    1.3 方法

    1.3.1 细胞培养及分组：将瘢痕疙瘩成纤维细胞转移至5 ml EP管中，并加入1 ml含10%胎牛血清的DMEM培养液，将两者混匀，并放于离心机中进行离心(1 000 rpm，5 min)，弃掉上清液，对细胞沉淀进行收集，之后加入2 ml含10%胎牛血清的DMEM培养液并吹打混匀，以适当密度接种于新的培养皿中，放置于培养箱中(37℃、5% CO

    )进行孵育。待细胞密度到达80%以上时，进行传代，当细胞密度达到80%以上时，弃去旧培养基，之后用3 ml的PBS缓冲液冲洗2～3次，将剩余的PBS缓冲溶液吸去 ......