周利丹，卢伊娜，王新亮，施雪梅，张 磊

    (上海珈凯生物科技有限公司 上海 200241)

    皮肤每天都暴露在可能导致皮肤刺激性的因素中，其中许多清洁剂(如洗手液)的基础成分表面活性剂是最重要的刺激因素之一[1]。特别是为了预防新冠肺炎(Corona virus disease 2019，COVID-19)传染，清洁剂的使用次数大大增加[2]。因此，明确开发具有对表面活性剂刺激皮肤的抗刺激剂/物质是工作和生活所必须的，也是应用研究的目标之一。本研究选择一种典型的表面活性剂十二烷基硫酸钠(Sodium lauryl sulphat，SLS)和细菌细胞壁的代表性成分脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)作为刺激物，分别从角质形成细胞、巨噬细胞、三维体外重组表皮模型(Episkin)、鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)维度，探讨由苦参根、胀果甘草根、黄芩根制备而成的复合植物提取物(SGS)对抗外界刺激的作用及可能的机制，为SGS在化妆品中的应用和SLS导致皮肤刺激性的机制研究提供参考。

    1 材料和方法

    1.1 SGS制备：前期研究发现单一苦参提取物、胀果甘草提取物、黄芩提取物均具有一定的抗炎作用[3-5]。SGS为上海珈凯生物科技有限公司提供，由甘草根粗提取物经加热处理，再与胀果甘草根粗提物、黄芩根粗提物复配，经分离提纯、脱色、脱味、调节pH等工艺制备而成，其中甘草酸含量经高效液相色谱法检测超过0.6%。

    1.2 试剂：人永生化表皮细胞(HaCaT细胞)、正常人表皮角质形成细胞(NHEK细胞)、小鼠单核巨噬细胞(Raw 264.7)，北纳生物细胞库；EpiSkin，上海斯安肤诺生物科技有限公司；SLS、LPS、四甲基偶氮唑盐(MTT)、地塞米松(Dex)，美国Sigma公司；DMEM高糖培养基、胎牛血清(FBS)、0.25%胰蛋白酶、RNA抽提试剂盒、Taqman荧光探针、实时荧光定量(RT-PCR)检测试剂盒，美国Thermo fisher公司；本研究所使用的Taqman荧光探针有KRT10(TaqMan探针货号：Hs00166289_m1)、KRT16(TaqMan探针货号：Hs00373910_g1)、AQP3(TaqMan探针货号：Hs00185020_m1)、FLG(TaqMan探针货号：Hs00856927_g1)、CASP14(TaqMan探针货号：Hs00201637_m1)、LOR(TaqMan探针货号：Hs01894962_s1)、GAPDH(TaqMan探针货号：Hs02786624_g1) ......