黎松 张敏 李蔼谕 吴亚光

    [摘要]目的：初步探究光動力疗法(Photodynamic therapy，PDT)对两种黑素瘤细胞迁移、侵袭的影响及作用机制。方法：取生长至对数期黑素瘤细胞A375和B16-F10，胰酶消化离心后计数后接种至六孔板内，培养使细胞融合度达到80%～90%以上后孵育光敏剂1 mmol/L 5-氨基酮戊酸(5-ALA)2 h后使用635 nm红光照射治疗，根据照射能量的不同分为0 J(对照组)、2.4 J(PDT 2.4J组)、4.8 J(PDT 4.8 J组)。采用划痕愈合实验和Transwell侵袭实验分别检测不同水平的PDT对B16-F10及A375系两种细胞迁移和侵袭能力的影响。采用蛋白质印迹法检测迁移和侵袭相关蛋白[Ki-67、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)、基质金属蛋白酶9(Matrix metalloproteinase 9，MMP9)]的相对表达量。结果：细胞划痕和Transwell实验的结果显示，PDT处理24 h后，相比对照组，PDT 2.4 J组及PDT 4.8 J组在B16-F10及A375两种细胞系中，划痕愈合率及侵袭细胞数目均明显减少(P<0.01)；相比于PDT 2.4 J组，PDT 4.8 J组的划痕愈合率及侵袭细胞数目明显减少(P<0.01)。两PDT组在Ki-67、VEGF及MMP9三种蛋白的表达水平上均明显低于对照组(P<0.01)；相比于PDT 2.4 J组，PDT 4.8 J组在三种蛋白的表达水平上更低(P<0.01) ......