【摘要】大鼠足垫皮肤存在角质层厚、组织层次复杂等特点,给石蜡切片的制作增加了很大的难度。我们利用大鼠足垫为毛囊诱导的对象,制作了大量的大鼠足垫石蜡切片,并进行相应的免疫组化实验,摸索出许多制作大鼠足垫石蜡切片的经验,藉此介绍以期作为相关研究者的参考。

    【关键词】大鼠;足垫;石蜡切片制作

    【中图分类号】R361.2 【文献标识码】A 【文章编号】1008-6455(2010)08-0430-01

    皮肤因其致密的角质层、复杂的组织层次、且各层次之间的密度差别非常大,因而成为皮肤病理科的难题之一。本课题组长期应用大鼠足垫作为毛囊诱导的对象,因实验要求动物标本的取材的需覆盖整个足垫且需深达肌层,使足垫皮肤石蜡切片的制作较普通皮肤切片难度大大提高。我们在长期的研究中积累了大量的经验,现将具体的制作过程及体会介绍如下。

    1 材料与方法

    1.1 材料处理与固定

    1.1.1 材料来源及处理:成年SD大鼠,雌雄不限,实验组用9#针头自足后跟进针,将体积0.1ml的人头皮毛乳头细胞微囊注入足垫皮下,观察到局部有皮丘形成后,迅速退针并以生物胶封闭进针口。6周后足垫皮肤取材行组织学检查。该实验的目的是观察毛乳头细胞微囊是否能诱导大鼠足垫无毛区形成毛囊结构,以及毛乳头细胞微囊的变化,因注射的层次在皮下组织与肌层之间,所以取材时要将整个足垫从表皮至肌层同时剪下,且在包埋之前不能剪碎以避免微囊漏出影响结果观察 ......