丹参治疗OSF的病理学形态及微血管密度变化的研究(1)
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【摘要】目的:探讨丹参注射液在OSF中的治疗作用和可能的作用机制，为此病的治疗开辟新途径。方法:从上皮、间质、腺体和肌组织四方面观察早、中、晚期OSF治疗前后病理学形态和微血管的数量及密度的变化。结果:病理形态和微血管密度显示丹参治疗后各期OSF有明显疗效，差异有统计学意义(P<0.01);OSF组间比较，差异无统计学意义(P>0.05)。结论:丹参治疗OSF有明显疗效，对血管内皮细胞具有保护作用，值得临床进一步研究和推广。
【关键词】口腔粘膜纤维病变；微血管；丹参
【中图分类号】R781.59 【文献标识码】A 【文章编号】1008-6455(2010)11-0028-03
Study on the pathology and themicrovessel density of Danshen treatment OSF
Lu LianmingWen WenZhou YanLi ShaLiu Ming
【Abstract】Objective:To observe the change of morphological and microvessel number and density before and after therapeutic and the effect of using Danshen injection on OSF.Methods: (1)OSF were observed including in the epithelium, interstitial tissues, glands and muscle tissue through the conventional pathological method，exminated the microvessel number.Results: The results of pathological examination and microvessel density showed that the Danshen had after treatment showedmarked effect on OSF, the difference was statistically significant (P<0.01); there was no signficant between group comparison (P>0.05). Conclusion: Danshen has significant effect on the treatment of OSF，Danshen play a protective role on vascular endothelial cells.
【Key words】oral submucous fibrosis; microvessel; Danshen
1材料与方法
1材料 根据患者的知情同意，按Pindborg的OSF病理学分期标准及临床表现[1],选用2004年1月至2008年10月间在我院口腔门诊就诊并经病理确诊的30例(早、中、晚各10例)OSF，患者全为男性，平均年零35.5岁，病程5月至8年。另取10例无不良嗜好的健康自愿者的口腔粘膜作为正常对照组。接受治疗的30名患者进行治疗前和丹参注射液治疗后活检，活检组织按病理常规处理后，分别HE和CD34染色。
2方法
2.1临床治疗方法:对30例OSF患者进行双颊部、双翼部下颌韧带、上腭两侧点状注射丹参注射液，总剂量4 ml/次，1次/周，平均注射10次，每次治疗后记录患者主诉症状和张口度、病损改变情况，停药3月后活检。
2.2免疫组化染色步骤及微血管计数:标本经4%甲醛固定后按常规处理，3um连续石蜡切片于60℃烤箱中烘烤3h，脱蜡至水化，按迈新公司ElivisonTM操作步骤[2、3]进行鼠单抗CD34染色后镜检。实验用人肺组织作阳性对照，用非免疫动物血清替代一抗作阴性对照。免疫组化评定标准采用双盲法，在光镜下随机取5个视野，计算每个视野血管数量。凡由内皮细胞或幼稚内皮细胞形成的管状、窄隙状、囊状和空泡状染色为棕黄色结构判定为可计数MVD，但管腔直径大于8个红血球直径的总和，以及坏死区的微血管和厚壁血管不计入总数内，按此方法由2名病理医师分别在光镜低倍下选取MVD密度最大的3个区，再在200倍视野下对微血管进行计数，取2人计数的均值作为MVD值，经SPSS122.0 for windows统计程序统计学分析，治疗前后各组微血管密度的比较采用t检验。
2结果
2.1丹参治疗后OSF病理学形态[4，5]
2.1.1早期治疗前：粘膜上皮萎缩、钉突变短、肥大或部分消失，棘层轻度增生肥厚，粘膜间质水肿、胶质纤维玻璃变性，血管扩张或狭窄，血管周中性粒细胞、淋巴细胞浸润。治疗后接近正常口腔粘膜组织(图1)。
2.1.2中期治疗前：粘膜表面角化，钉突消失，棘层少数细胞空泡变，粘膜下胶原纤维玻璃变性、染色加深、细胞成分减少；扩张的血管周大量淋巴细胞、浆细胞浸润，肌纤维变性；治疗后上皮棘层仍可见少量空泡细胞，肥大的钉突形成，肌纤维及肌组织变性较治疗前减轻，纤维束较稀，新生血管形成，腺体有少量的炎细胞浸润(图2)。
2.1.3晚期治疗前：上皮各层出现细胞空泡变，以棘层较密集，钉突消失，胶原全部璃变，折光性强，血管狭窄或闭塞，血管周炎细胞浸润；肌组织变性断裂，腺体和肌组织间可见淋巴细胞和浆细胞浸润。治疗后：固有层及粘膜下层的胶原染色变浅，致密的纤维束变稀疏，毛细血管增生，炎性细胞浸润减少(图3)。
2.1.4治疗后各组微血管密度计数(X±S表示)：阳性对照组织和正常口腔颊部粘膜均可见黄棕色阳性的微血管 ......
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