紫外线照射对体外培养人表皮黑素细胞MC1R受体的影响(2)
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MTT法测定不同剂量UVA照射后黑素细胞数量的变化(细胞计数0.75×104/ml)
注：*表示 P<0.05，与对照相比有显著性差异。
2.3 NaOH溶解法测定不同剂量UVA照射后黑素含量的变化
(细胞数5.4×105/ml)
注：*表示 P<0.05，与对照相比有显著性差异。
NaOH溶解法测定不同剂量UVB照射后酪氨酸酶的变化(细胞计数5.4×104/ml)
注：*表示 P<0.05，与对照相比有显著性差异。
2.6 MC1R基因mRNA的表达：照射组的MC1R基因mRNA的表达也明显高于对照组(0.69±0.011vs 0.25±0.010,p0.001)。
3 讨论
不同人种皮肤颜色差异是人类最为显著的特性之一,差异由遗传学控制，反映人类遗传学特性。人类皮肤色素形成具有半孟德尔遗传模式，多基因特性，由主要基因和其他的修饰基因共同作用形成。色素形又是外界环境影响下的各基因同步化相互作用的一大性状,明确这些可变异基因和各种环境一度是极大的挑战。MC1R被认为是决定人类皮肤颜色的主要基因之一，而紫外线对于人类皮肤的影响,包括光老化，光损伤，造成色素沉着反应，导致皮肤肿瘤等。紫外线对人类黑素细胞及黑素合成有着复杂的影响。[4] [5]
为了研究体外培养人黑素细胞对于紫外线照射后黑素细胞MC1R的作用影响，我们采用体外培养人黑素细胞作为研究对象，对其进行UVA和UVB的照射，然后分别采用MTT法测定照射前后的细胞数量变化; 以NaOH溶解法测定黑素含量和半定量 RT—PCR法检测UVR照射后黑素细胞MC1R的表达。结果发现:UVA照射后，黑素含量在较低照射剂量时便有较对照组升高的趋势，仅在照射剂量为200mj/cm2时,照射组与对照组相比有显著的统计学差异;UVB照射后，在照射剂量为10-20mj/cm2时照射组与对照组相比有显著的统计学差异，结果与目前相关文献数据基本吻合。,目前大多数学者认为UVB的这种促进黑素生成的作用是与其生存环境中的角质形成细胞密切相关的，今后研究重点将围绕共培养模式下的细胞间相互作用。另外，UVA和UVB照射后黑素细胞MC1R基因mRNA的表达也明显高于对照组，提示雌激素受体的表达确实与不同剂量与类型的紫外线照射作用明显相关。
总之，我们利用体外培养黑素细胞的方法，探讨UVA和UVB对于人类黑素细胞黑素含量及MC1R受体表达等方面的影响，明确了UVA和UVB对于黑素细胞合成黑素的能力的有效浓度及MC1R在紫外线作用下高表达是与黑素细胞合成黑素能力相一致的。通过本实验，我们进一步加深认识人类皮肤颜色的遗传学特性，今后将继续研究影响皮肤颜色表型基因位点多态现象的水平，效应及其相互作用等内容。对于MC1R研究，重点依然是是确定其哪一等位基因起显著意义，更多的联系其有价值的表型特征，进一步扩大皮肤颜色遗传学领域的研究价值。
参考文献
[1] John PR, MakovaK, Li WH, et al.Ramsay M. DNA polymorphism and selection at the melanocortin-1 receptor gene in normally pigmented southern African individuals [J].Ann. N.Y ......
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