苦瓜籽RIP的分离纯化及其对K562细胞作用的研究
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摘 要:目的:采用强阳离子交换层析柱(SP Sepharose High Performance)分离纯化苦瓜籽RIP,并观察苦瓜RIP对人红白血病细胞株K562细胞的抗肿瘤活性。方法:采用强阳离子交换层析柱(SP Sepharose High Perform-ance)分离纯化苦瓜籽RIP,SDS-PAGE、IEF等实验鉴定苦瓜籽RIP的纯度;以一定浓度梯度的苦瓜籽RIP处理K562细胞72 h,CCK-8检测其对细胞生长的影响;流式细细术(Annexin V)、细胞形态学(光镜及电镜)等方法检测苦瓜RIP诱导K562细胞凋亡的产生。结果:应用强阳离子交换层析柱(SP Sepharose High Performance)来分离纯化苦瓜籽RIP,可以快速方便分离得到高纯度的苦瓜RIP,得率也较高;一定作用剂量的苦瓜RIP不仅具有抑制k562细胞生长的活性(9.1μg/mL)的作用,还可诱导K562细胞发生凋亡。结论:运用强阳离子交换层析柱(SPSepharose High Performance)分离纯化苦瓜RIP是便捷可行的;苦瓜RIP具有抗肿瘤的活性,其作用可能是通过诱导细胞发生凋亡来实现。
关键词:苦瓜;核糖体失活蛋白;阳离子交换层析;K562细胞;细胞凋亡
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