乳鼠心肌细胞的培养
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摘要：目的:原代培养乳鼠心肌细胞及进行形态学观察。方法：胰蛋白酶和Ⅱ型胶原分离消化心肌组织，差速贴壁和化学方法纯化心肌细胞。结果：12h心肌细胞基本贴壁，1～3天形成细胞簇，并出现同步搏动。结论：胰蛋白酶和胶原酶混合使用可以分离出数量较多、状态良好的心肌细胞。
关键词：心肌细胞；乳鼠；原代培养
中图分类号：R-332文献标识码：A
文章编号：1673-7717(2007)04-0691-02
随着分子生物学和细胞生物学的发展，细胞水平的研究日益受到重视。体外培养的心肌细胞可保存其结构及功能上的某些特点，具有自发性搏动，可在不受神经、体液因素的影响下，直接进行心肌细胞的生理、病理、药理、毒理及能量代谢等方面的研究「1」。以及从培养的心肌细胞中提取有价值的生物因子，心肌细胞培养有着广阔的应用前景。根据Simpon[2]的方法并稍加改进培养乳鼠心肌细胞叙述如下。
1 实验材料
1.1动物1～3天的Wistar乳鼠，由甘肃中医学院SPF级实验动物中心提供。
1.2实验试剂及设备DF培养液：将DMEM培养基与HamF12培养基按1∶1比例混合，5-溴脱氧尿嘧啶：均为美国Sigma公司产品；新生牛血清(NBCS)：杭州四季青生物材料工程研究所；胰蛋白酶和II型胶原酶(上海生物公程有限公司)；α-横纹肌肌动蛋白单克隆抗体(α-sarcomericactin,α-SA)，链霉素亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(strept avidin biotin peroxydase complex, SABC)免疫组化试剂盒：武汉博士德生物工程有限公司。二氧化碳培养箱(德国Heraeus公司)；超净工作台(苏净集团)；倒置相差光学显微镜(日本Olympus公司) ......
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