通络救脑口服液对AD模型大鼠Bax和Bcl-2mRNA的影响(2)
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表示,统计分析采用完全随机设计资料的方差分析,组间两两比较运用SNK检验。
3结果
3.1产物鉴定 各产物的熔解曲线仅有1个峰,说明为单一片段扩增,熔解温度分别为GAPDH 86.9℃,Bax 86.5℃,Bcl-2为84.1℃。扩增产物经2%琼脂糖电泳,紫外线下扫描分析,GAPDH为120~150bp,Bax为190~210bp,Bcl-2为110~130bp。符合设计的片断长度。
3.2扩增效率分析 将一只大鼠大脑海马的RNA反转录成eDNA并以2倍梯度稀释,相对浓度为1、0.5、0.25、0.125,以其为实时PCR扩增模板,实验中各个标准均做2个复孔。另加3个无模板的阴性对照,所有计算采用每个样本所得的平均循环数值,且样本复孔的Ct值之间差异小于1个循环。以GAPDH、Bax和Bcl-2的Ct值与对应的相对浓度对数值作图,GAPDH、Bax和Bcl-2对应的直线相关系数为0.9986、0.9962和0.9937,斜率为-3.3186、-3.3551和-3.2455,扩增效率根据E=10(-1/alope)计算,EGAPDH为2.0014,EBax为1.9863,EBcl-2为2.0329。结果表明GAPDH、Bax和Bcl-2扩增效率一致,2-△△ct相对定量方法适合于本试验。
3.3大鼠海马注射AB1-40后Bax mRNA表达的变化及加通络救脑口服液的干预作用 分别扩增GAPGH和Bax,每样本作2复孔,得到两组Ct平均值 ......
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