不同碘含量消瘿散结中药对碘缺乏机体甲状腺功能和形态影响的比较研究(2)
算)。夏枯草组：低碘饮食，每天同一时间同一体积(1mL)胃管灌服含夏枯草生药量13.5昏/(kg·d)(按人的常规日处方剂量，按与人相同体表面积折算)。分别在给处理因素后的0、7、28天处死动物，每组每次相应处死12只动物。
2.2 标本采集 收集尿液：处死前1天，将大鼠放入代谢笼中，留24h空腹尿，吸取3-5mL，放入5mL eppendorf管中，-20℃冰柜中保存。收集血清：处死前，称体重，20%乌拉坦腹腔注射麻醉，腹主动脉采血，3000r/min分离10min，血清存入1.5 mleppendorf管中，-20℃冰柜中保存。快速准确取材，迅速分离甲状腺后，电子天平称湿重，迅速放入4%的多聚基甲醛中固定，每组有2叶甲状腺30S内迅速浸入2.5%戊二醛(pH7.3，0.1 M二甲砷酸钠缓冲液配制)中固定。
2.3 甲状腺功能测定 血清TT3，RIA法，法国CIS bio公司试剂盒；血清TT4，RIA法，法国CIS bio公司试剂盒；血清TSH，RIA法，Amersham，USA；血清rT3，RIA法，中国原子高科有限公司公司试剂盒；甲状腺组织TT3、TT4，RIA法，法国CIS bio公司试剂盒。
, 百拇医药
2.4 甲状腺形态学观察 4%多聚基甲醛固定，石蜡包埋，5μm厚切片，常规HE染色，光学显微镜下观察。快速准确取材，30s内迅速浸入固定液2.5%戊二醛(pH7.3，0.1 M二甲砷酸钠缓冲液配制)中，常规制作投射电镜标本，透射电镜下观察。
2.5 甲状腺形态学的定量观察 用美国UIC公司的Metamoth图像分析系统/olympus(DP10)/显微镜(BX51)观察各组Wistar大鼠甲状腺滤泡上皮细胞高度，滤泡腔的面积。每组随机选取4只大鼠(雌雄各半)，取甲状腺最大截面做HE切片，低倍镜下输2个视野(包含了整个甲状腺截面)，存入Metamorph图像分析系统中。每个图像中非增生的滤泡中随机选取15个滤泡上皮细胞，每组共选60个，测量上皮细胞高度。同时从每个图像中随机选取10个非增生滤泡，每组共选40个，测定滤泡腔的面积。所有数据均存Excell表中，用SPSS13.0软件包进行统计学分析。
2.6 尿碘测定 采用中华人民共和国卫生部行业标准规定的方法。
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2.7 统计学处理 尿碘值用尿碘中位数表示，其余数值用x±s表示。两个样本均数比较用t检验，2个以上样本均数比较用方差分析。P<0.05为有统计学意义。全部数据均输入Excell工作表中，用SPSS13.0软件包做统计学处理。
3 实验结果
3.1 MUI测定结果 各组MUI值。
3.2 饲料与单味中药碘含量 饲料饮片：20μg/kg；昆布饮片：794.7mg/kg；昆布汤剂：1760.9/μg/L；夏枯草饮片：38.4mg/kg；夏枯草汤剂：56μg/L。
3.3 甲状腺功能测定结果。予处理因素28天时，与模型对照组比，常规剂量、3倍剂量昆布血清TT3值明显增加P<0.001，P<0.01，血清TT4值明显增加，血清TSH值明显降低均P<0.01，甲状腺组织TT3值TT4值明显增加P<0.01。与正常对照组比，常规剂量昆布血清TT3值明显增加P<0.01，3倍剂量昆布血清TT3值，TT4值明显增加P<0.001，血清TSH明显降低P<0.01。与模型对照组比，夏枯草组血清TT3值明显增加，TSH值明显降低P<0.001。与正常对照组比，夏枯草组血清TT3值明显增加P<0.01，血清TSH值明显降低，甲状腺组织TT3值明显增加P<0.001。与常规剂量昆布比，夏枯草组血清TT3值增加，TT4值降低，TSH值增加，但组间比较差异无显著性，甲状腺组织TT3值TT4值明显降低P<0.001。
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3.4 各组大鼠甲状腺形态学参数的测定 甲状腺滤泡上皮细胞高度的变化。甲状腺滤泡腔面积的变化。
3.5 各组大鼠甲状腺形态观察 光学显微镜观察：正常对照组：甲状腺滤泡腔大小不等，呈圆形或椭圆形，滤泡上皮呈立方形，滤泡周围可见毛细血管。
3倍昆布28天：与模型对照组相比，70%滤泡腔增大，30%的滤泡腔正常大小，滤泡腔内充满胶质，近80%的滤泡之间界限清楚，滤泡周围血管较丰富，滤泡上皮细胞高度有所减低，呈矮柱状。
4 讨 论
4.1 中医对瘿病的认识 瘿病一名，首见于《诸病源候论·瘿候》。早在公元前3世纪，我国已有关于瘿病的记载。《吕氏春秋·尽数篇》所说的“轻水者，多秃与瘿人”不仅记载了瘿病的存在，而且观察到瘿的发病与地理环境密切有关。瘿病的病因主要是情志内伤和饮食及水土失宜，但也与体质有密切关系。气滞痰凝壅结颈前是瘿病的基本病理，日久引起血脉瘀阻，以气、痰、瘀三者合而为患。部分病例，由于痰气郁结化火，火热耗伤阴精，而导致阴虚火旺的病理变化，其中尤以肝、心两脏阴虚火旺的病变更为突出。
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4.2 富碘中药与非富碘中药 中医治疗瘿病应用软坚散结消瘿的中药，包括富碘与非富碘中药。我国利用富碘中药昆布作为药用鞍早，《名医别录》上记载昆布“主十二种水肿，瘿瘤，聚结气，瘿疮。”《本草纲目》谓“昆布，海岛人爱食之，为无好菜，只食此物，服久相习，病亦不起……。”昆布味咸，气寒，咸能软坚，寒可清热，李东垣认为“瘿坚如石者，非此不除”。《本经》谓“夏枯草主寒热，鼠瘘，头疮，散瘿结气。”通过整理历代医家治疗瘿病的104首方剂，统计出临床使用频率较高的是昆布和夏枯草，昆布作为清热、利水、软坚散结的传统中药，在中医临床上应用，距今已有2200年的历史，夏枯草又有清热养阴、理气化痰之效，既可消瘿又可平抑甲亢同时并举。从本实验测定结果看，单味中药昆布饮片碘含量为794.7mg/kg，煎剂中碘含量为
1760.9μg/L，夏枯草饮片碘含量为38.4mg/kg，煎剂中碘含量为56μg/L，进一步证明昆布为碘含量丰富的中药即富碘中药，夏枯草虽然同样具有软坚散结的作用，但为适碘中药。
4.3 碘过量与甲状腺疾病 甲状腺疾病是危害人类生命健康的临床常见疾病，碘是影响甲状腺自身免疫，甲状腺功能和形态的重要因素之一，碘缺乏可引起低碘甲状腺肿，碘过量可引起高碘甲状腺肿。近年来有关碘过量引起甲状腺肿，甲状腺功能亢进，甲状腺功能减退以及甲状腺自身, 百拇医药(高天舒 高 巍 崔 鹏 李红梅)
2.2 标本采集 收集尿液：处死前1天，将大鼠放入代谢笼中，留24h空腹尿，吸取3-5mL，放入5mL eppendorf管中，-20℃冰柜中保存。收集血清：处死前，称体重，20%乌拉坦腹腔注射麻醉，腹主动脉采血，3000r/min分离10min，血清存入1.5 mleppendorf管中，-20℃冰柜中保存。快速准确取材，迅速分离甲状腺后，电子天平称湿重，迅速放入4%的多聚基甲醛中固定，每组有2叶甲状腺30S内迅速浸入2.5%戊二醛(pH7.3，0.1 M二甲砷酸钠缓冲液配制)中固定。
2.3 甲状腺功能测定 血清TT3，RIA法，法国CIS bio公司试剂盒；血清TT4，RIA法，法国CIS bio公司试剂盒；血清TSH，RIA法，Amersham，USA；血清rT3，RIA法，中国原子高科有限公司公司试剂盒；甲状腺组织TT3、TT4，RIA法，法国CIS bio公司试剂盒。
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2.4 甲状腺形态学观察 4%多聚基甲醛固定，石蜡包埋，5μm厚切片，常规HE染色，光学显微镜下观察。快速准确取材，30s内迅速浸入固定液2.5%戊二醛(pH7.3，0.1 M二甲砷酸钠缓冲液配制)中，常规制作投射电镜标本，透射电镜下观察。
2.5 甲状腺形态学的定量观察 用美国UIC公司的Metamoth图像分析系统/olympus(DP10)/显微镜(BX51)观察各组Wistar大鼠甲状腺滤泡上皮细胞高度，滤泡腔的面积。每组随机选取4只大鼠(雌雄各半)，取甲状腺最大截面做HE切片，低倍镜下输2个视野(包含了整个甲状腺截面)，存入Metamorph图像分析系统中。每个图像中非增生的滤泡中随机选取15个滤泡上皮细胞，每组共选60个，测量上皮细胞高度。同时从每个图像中随机选取10个非增生滤泡，每组共选40个，测定滤泡腔的面积。所有数据均存Excell表中，用SPSS13.0软件包进行统计学分析。
2.6 尿碘测定 采用中华人民共和国卫生部行业标准规定的方法。
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2.7 统计学处理 尿碘值用尿碘中位数表示，其余数值用x±s表示。两个样本均数比较用t检验，2个以上样本均数比较用方差分析。P<0.05为有统计学意义。全部数据均输入Excell工作表中，用SPSS13.0软件包做统计学处理。
3 实验结果
3.1 MUI测定结果 各组MUI值。
3.2 饲料与单味中药碘含量 饲料饮片：20μg/kg；昆布饮片：794.7mg/kg；昆布汤剂：1760.9/μg/L；夏枯草饮片：38.4mg/kg；夏枯草汤剂：56μg/L。
3.3 甲状腺功能测定结果。予处理因素28天时，与模型对照组比，常规剂量、3倍剂量昆布血清TT3值明显增加P<0.001，P<0.01，血清TT4值明显增加，血清TSH值明显降低均P<0.01，甲状腺组织TT3值TT4值明显增加P<0.01。与正常对照组比，常规剂量昆布血清TT3值明显增加P<0.01，3倍剂量昆布血清TT3值，TT4值明显增加P<0.001，血清TSH明显降低P<0.01。与模型对照组比，夏枯草组血清TT3值明显增加，TSH值明显降低P<0.001。与正常对照组比，夏枯草组血清TT3值明显增加P<0.01，血清TSH值明显降低，甲状腺组织TT3值明显增加P<0.001。与常规剂量昆布比，夏枯草组血清TT3值增加，TT4值降低，TSH值增加，但组间比较差异无显著性，甲状腺组织TT3值TT4值明显降低P<0.001。
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3.4 各组大鼠甲状腺形态学参数的测定 甲状腺滤泡上皮细胞高度的变化。甲状腺滤泡腔面积的变化。
3.5 各组大鼠甲状腺形态观察 光学显微镜观察：正常对照组：甲状腺滤泡腔大小不等，呈圆形或椭圆形，滤泡上皮呈立方形，滤泡周围可见毛细血管。
3倍昆布28天：与模型对照组相比，70%滤泡腔增大，30%的滤泡腔正常大小，滤泡腔内充满胶质，近80%的滤泡之间界限清楚，滤泡周围血管较丰富，滤泡上皮细胞高度有所减低，呈矮柱状。
4 讨 论
4.1 中医对瘿病的认识 瘿病一名，首见于《诸病源候论·瘿候》。早在公元前3世纪，我国已有关于瘿病的记载。《吕氏春秋·尽数篇》所说的“轻水者，多秃与瘿人”不仅记载了瘿病的存在，而且观察到瘿的发病与地理环境密切有关。瘿病的病因主要是情志内伤和饮食及水土失宜，但也与体质有密切关系。气滞痰凝壅结颈前是瘿病的基本病理，日久引起血脉瘀阻，以气、痰、瘀三者合而为患。部分病例，由于痰气郁结化火，火热耗伤阴精，而导致阴虚火旺的病理变化，其中尤以肝、心两脏阴虚火旺的病变更为突出。
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4.2 富碘中药与非富碘中药 中医治疗瘿病应用软坚散结消瘿的中药，包括富碘与非富碘中药。我国利用富碘中药昆布作为药用鞍早，《名医别录》上记载昆布“主十二种水肿，瘿瘤，聚结气，瘿疮。”《本草纲目》谓“昆布，海岛人爱食之，为无好菜，只食此物，服久相习，病亦不起……。”昆布味咸，气寒，咸能软坚，寒可清热，李东垣认为“瘿坚如石者，非此不除”。《本经》谓“夏枯草主寒热，鼠瘘，头疮，散瘿结气。”通过整理历代医家治疗瘿病的104首方剂，统计出临床使用频率较高的是昆布和夏枯草，昆布作为清热、利水、软坚散结的传统中药，在中医临床上应用，距今已有2200年的历史，夏枯草又有清热养阴、理气化痰之效，既可消瘿又可平抑甲亢同时并举。从本实验测定结果看，单味中药昆布饮片碘含量为794.7mg/kg，煎剂中碘含量为
1760.9μg/L，夏枯草饮片碘含量为38.4mg/kg，煎剂中碘含量为56μg/L，进一步证明昆布为碘含量丰富的中药即富碘中药，夏枯草虽然同样具有软坚散结的作用，但为适碘中药。
4.3 碘过量与甲状腺疾病 甲状腺疾病是危害人类生命健康的临床常见疾病，碘是影响甲状腺自身免疫，甲状腺功能和形态的重要因素之一，碘缺乏可引起低碘甲状腺肿，碘过量可引起高碘甲状腺肿。近年来有关碘过量引起甲状腺肿，甲状腺功能亢进，甲状腺功能减退以及甲状腺自身, 百拇医药(高天舒 高 巍 崔 鹏 李红梅)