猪鼻黏膜作为鼻腔给药离体实验用黏膜的可行性实验研究
摘要:目的:以水蛭素为模型药物。考察猪鼻黏膜作为鼻腔给药离体实验用黏膜的可行性。方法:以同位素示踪法标记和测定水蛭素,采用Valia—Chien水平扩散池法,以兔鼻黏膜作对照。计算猪鼻黏膜和兔鼻黏膜的累积渗透量和渗透系数。结果:离体猪鼻黏膜与离体兔鼻黏膜比较,渗透系数无显著性差异(P0.05为差异无显著性意义。
2 实验方法
2.1 水蛭素的标记与测定方法
2.1.1 I-水蛭素的制备 标记:取涂有Iodogen(5ug)的反应小试管,依次加入水蛭素溶液50ul(1.0mg/mL),NamI溶液2—4uL(18CBq/mL),室温条件下搅拌反应5min后,加入0.5mL0.01mol/L pH7.4的PBS缓冲液终止反应。标记反应接近5min时,马上取样,用快速硅胶簿层层析纸(rrI/SG)法分析标记率。本阶段共进行用于动物试验的6次正式标记,其标记率有时可达30%-75%。
纯化:以上反应液立即用Sephadex G—15层析柱(1cmx30cm)进行纯化,洗脱液为0.01mol/L pH7.4的PBS缓冲液,流速lmL/min。收集洗脱液(1mL/管)并依次测量各管的放射性量 ......
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