蛛丝对股动脉血流亚急性阻断作用的研究(2)
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1 材料与方法
1.1 实验动物与实验准备
30只成年雄性SD大鼠平均体重(180±30)g随机分成两组，对照组10只，模型组20只。按动物实验室标准条件[温度(23±2)℃；相对湿度(65±2)%；12h昼夜循环]饲养动物。标准动物饲料喂养，任意饮水。本实验中所用的SD大鼠购于浙江省医学科学院实验动物中心。实验用大腹圆蜘蛛(体重95～190mg)捕捉于杭州植物园，由浙江大学昆虫研究所鉴定。
1.2 动物模型的制作
在造模手术之前，在室温(23±2)℃和相对湿度(25±2)%条件下，用10cm×10cm的小塑料框架从5只大腹圆蜘蛛尾部将蛛丝盘绕下来，转动速度为1cm/s，该速度与蜘蛛在自然状态下吐丝结网的速度近似[9]。将10cm蜘蛛拖丝折叠5次而成一段2cm结扎用丝，备用。 大鼠在手术前晚禁食8h，手术当日采用45mg/kg戊巴比妥钠腹腔注射给药。大鼠麻醉后于左后肢内侧皮肤切开一纵向切口，分离股动脉两侧伴行的股静脉及神经，彻底暴露股动脉。将蛛丝以适当的力度缠绕于造模组大鼠股动脉共10周，最终形成2mm长的结扎点。对照组大鼠暴露股动脉但不进行结扎操作。术后缝合切口并消毒，肌肉注射青霉素(25万U•kg-1•d-1)，从手术当日起连续注射3天。
1.3 血流量 收缩压和舒张压的测量
于术前、结扎即刻、结扎后1、2、3、5、10、20、30min采用Biopac多导生理记录仪(型号:MP-150，美国Biopac system公司)及超声多普勒探头(型号:CBI-202，美国Triton Technology公司)记录股动脉血流。将连接换能器的探针插入股动脉结扎点远心端10mm处，测定股动脉压力。测量完毕拔出探针后，出血点用凝胶海绵压迫止血。
1.4 血清OMP的生化测定
于术前、手术即刻、术后1、2、3、5日尾静脉取血，测定血清OMP含量。其生化测定方法参照相关文献[10-13]。血清中蛋白质浓度的测定则运用Lowry蛋白质定量法[14-16]。结果以nmol OMP/mg 蛋白质含量来表示 ......
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