定心胶囊对房颤大鼠心房电重构的影响(2)
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1 材料和方法
1.1 房颤大鼠模型的建立
选择体重250～300g健康Wistar大鼠100只，雄性，清洁级。随机分为正常对照组(10只)及造模组(90只)。采用氯化钙-乙酰胆碱混合液以鼠尾静脉给药的方式建立房颤的动物模型[1]。取1只大鼠，称重，用3%的戊巴比妥钠30mg/kg进行腹腔注射麻醉，待老鼠昏迷后将其仰卧位固定在木板上，先描记大鼠的正常心电图(记录标准肢导联)(见图1)。将其尾部的鳞毛刮干净后注射氯化钙-乙酰胆碱混合液1mL/kg(每mL中含：Ach 33μg，CaCl2 10mg，新鲜配制)，用针形电极刺入四肢，描记大鼠此时的心电图(记录标准肢导联)(见图2)。连续给药4周后，停药后做心电图(记录标准肢导联)(见图3)。心电图有典型房颤改变者为房颤造模成功。
1.2 实验分组及用药
造模成功大鼠，随机分为AF模型组、定心胶囊治疗组、维拉帕米对照组，加正常对照组，由于造模中有部分大鼠死亡，最后平均每组8只大鼠。
正常组、模型组每日1次灌服同等容积的生理盐水；定心胶囊治疗组：灌服相当于16.2g/(kg•d)生药的定心胶囊，每日2次；维拉帕米对照组灌服相当于4.5mg/(kg•d)生药的维拉帕米，每日2次。共用药4周。4周后观察大鼠测定各组大鼠心肌组织Ca2+-ATP酶基因表达、L-型钙通道基因表达及心肌组织超微结构的改变。
1.3 定心胶囊的制备
药物组成，生地、人参、炙甘草、麦冬、丹参等共计8味中药。定心胶囊由辽宁中医药大学附属医院药剂科制备。制成定心胶囊蒸流水溶液。
2指标测定
2.1 心肌组织L-型钙通道基因表达的测定
用RT-PCR方法测定L-型钙通道mRNA表达和β-actin表达，并对RT-PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳；再计算L-型钙通道mRNA/β-actin的灰密度比值进行组间比较 ......
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